Semana de la ciencia 2014

Dossier
Práctica de Biología
Semana de la Ciencia 2014

1. Disolución del Agar-agar
Disolver 1,5 g de Agar bacteriológico en 125 ml de agua destilada
tibia, una vez que esté disuelto verterloen las placas de Petri sin llenar las
placas por completo.

Figura 1. Placas de Petri con Agar.

Observar el tiempo que tarda en gelificar y testar la dureza del
gel. Una vez endurecido,inocular una cepa de microalgas y observar el
crecimiento a lo largo del tiempo, cuidando que tengan luz para que puedan
crecer.

Esquema 1. Inoculación en placa de Petri.

1.1. Materiales
-Placas de Petri

-

Agar bacteriológico

-

Vasos de precipitado

-

Balanza y cucharillas

-

Agua destilada

-

Probetas

-

Microalgas

1.2 Cuestiones
-

¿Qué es y dedónde se extrae el agar-agar?

-

¿Se disuelve en agua fría?

-

¿Es un gel reversible?

-

¿Qué necesitan las microalgas para crecer en placa?

2. Extracción de Pigmentos
2.1.Clorofilas
Para la extracción y determinación de clorofilas se tomarán 2 gramos
cada muestra y se homogeneizarán con un mortero. Para la extracción se las
clorofilas el solvente a usar serán 4 ml deacetona o el metanol,
posteriormente se recogerá el sobrenadante en un tubo eppendorf y se
centrifugará durante 5 min a 9.000 r.p.m a una temperatura de 15ºC.
Una vez centrifugado se tomará de nuevo elsobrenadante dónde
están concentrados los pigmentos y se colocarán con cuidado de no
resuspenderlos en las cubetas del espectrofotómetro y ser cuantificados por
espectrofotometría de acuerdo conla ecuación (Wellburn, 1994):
Cl a (µg ml-1) = 16,72 A665,2 – 9,16 A652,4

Figura 1. Proceso de extracción.

2.2. Ficobiliproteínas
En el caso de las ficobiliproteinas (ficocianina yficoeritrina) se realiza
el mismo proceso que para la extracción de las clorofilas pero en esta
ocasión el solvente a utilizar serán 4 mililitros de tampón fosfato (0,1 M; pH
6,0) ya que son pigmentos...