Sensibilización De Bacterias Resistentes A Rifampicina

Autores:
Ana Hernandez De Sande
Antonio Orgaz González-Carpio
Ana Cristina Salgado Arenal
Autores:
Ana Hernandez De Sande
Antonio Orgaz González-Carpio
Ana Cristina Salgado Arenal
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Sensibilizaciíon de cepas S. aureus a rifampicina mediante bacteriófago φMR11 |
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Trabajo Procesos y Productos Biotecnológicos |

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Sensibilizaciíon de cepas S. aureus a rifampicinamediante bacteriófago φMR11 |
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Trabajo Procesos y Productos Biotecnológicos |

ÍNDICE DEL TRABAJO

1. Introducción del producto: definición y características
2.1. Staphylococcus aureus y Rifampicina
2.2. Producto que vamos a crear
2.3.1. Nueva terapia basada en fagos

2. Estudio y desarrollo del proyecto:
3.3. Mutaciones en el gen rpoB provocan en S.aureus resistencia a rifampicina
3.4. Cultivo S. aureus
3.5.2. Morfología y aislamiento
3.5.3. Identificación
3.5. Selección de cepas resistentes
3.6.4. Cepa bacteriana
3.6.5. Selección de la frecuencia de mutantes resistentes a rifampicina
3.6.6. Identificación de mutantes resistentes a rifampicina por PCR
3.6.7. Ensayo deadaptación
3.6. Genotipado de mutaciones por PFGE de las cepas resistentes
3.7. Identificación de cepas sensibles
3.8. MSLT

3. Construcción del plásmido:
* Amplificación gen rpoB
* Inserción en el plásmido
* Sustitución gen de selección
* Generación de tres plásmido diferentes
* Eliminación de eventos de recombinación homóloga espontáneos
*Comprobación y estudio de MIC

4. Generación de fago
* Definición del fago
* Estudio del genoma del fago
* Modificación del genoma del fago
* Generación de fagos modificados
* Infección y estudio de MICs

5. Modo de aplicación

6. Legislación

7. Referencias bibliográficas

1. INTRODUCCIÓN DEL PRODUCTO: DEFINICIÓN Y CARACTERÍSTICAS

La creación de nuevosantibióticos en la clínica asistencial ha disminuido en los últimos quince años, de modo paralelo al incremento en la aparición de resistencias por parte de los microorganismos a los antibióticos convencionales, como efecto de la presión selectiva. Este hecho es de vital importancia en las Unidades de Cuidados Intensivos (UCI) de los hospitales.
Las principales resistencias a antibióticosdetectadas en estas unidades corresponden principalmente con la resistencia a meticilina y vancomicina de Staphylococcus aureus y la resistencia a antibióticos carbapenémicos de las bacterias Pseudomonas aeruginosa y Acinetobacter baumanni [1]. Estos microorganismos son también resistentes, en la mayoría de los casos, a otros antibióticos como los aminoglucósidos, fluoroquinilonas y macrólidos.
Larápida aparición de resistencias a los antibióticos es debida, principalmente a la amplia y a veces inadecuada utilización de los mismos. Este problema aumenta año tras año, y la incidencia de microorganismos multirresistentes (MMR) está creciendo, principalmente en las Unidades de Cuidados Intensivos (UCI). La infección con MMR está asociada al fracaso terapéutico, la prolongación de la estanciahospitalaria, el incremento de los costes hospitalarios y el aumento de los ratios de mortalidad, sobre todo en pacientes críticos [2].
Al respecto, la Organización Mundial de la Salud, el parlamente europeo, la FDA y muchas organizaciones científicas han estimado que la eliminación de estas resistencias en patógenos es una acción prioritaria.
La creación de nuevos antibióticos y cocktails de losmismos es una de las alternativas que se están utilizando para tratar de solventar este problema, pero el uso de antibióticos nuevos no previene de la aparición de nuevas resistencias, además de suponer unos elevados costes a los que las empresas farmacéuticas no pueden hacer frente.
Algunas alternativas a los antibióticos son:
* El uso de péptidos antimicrobianos, que son pequeñas...