simulador de enzimas

“Ecuación de Michaelis-Menten”


Bibliografía:
Bohinski, R. (1976). Bioquimica. Massachusetts. Allyn and Bacon, Inc, de Boston. 63,64,65,66,67,68


Resumen:
Nuestro objetivo fue aplicar la ecuación de Michaelis-Menten y la ecuación de Lineweaver-Burk para graficar datos de una reacción enzimática y obtener la velocidad máxima (Vmax) y constante de Michaelis-Menten (KM) apartir de esto realizamos la hipótesis en la que los datos obtenidos (el cambio en la concentración de sustrato ocasionara un cambio en velocidad de la reacción) la gráfica donde se utiliza la ecuación de Michaelis-Menten resultará ser una hipérbola donde la velocidad máxima será un dato asintótico, es decir, que no llega a ser, pero que si se aproxima a él. Y la KM será la concentración delsustrato que corresponda a la mitad de la velocidad máxima.
Con la ayuda del simulador de enzimas cambiamos las concentraciones del sustrato (proteína) y trabajamos con la enzima pepsina por lo que la velocidad de la reacción iban cambiando y aumentando conforme se aumentaba las concentraciones, con esto elaboramos nuestras graficas como resultado fue una hipérbola.
Las concentracionesdel sustrato al aumentar también aumenta la velocidad por lo que son directamente proporcionales y cuando la velocidad de la reacción deja de crecer se llega a una velocidad máxima, esto se debe a que todas la moléculas de la pepsina ya están ocupadas por moléculas de sustrato (proteínas) formando el producto (péptido). A partir de esto elaboramos nuestro diseño experimental donde sacamos ellote testigo o control y experimental, la variable independiente, la dependiente y la constante, luego elaboramos nuestro prototipo y experimento poniendo una temperatura de 36ºC y un pH de 2 para obtener el producto el péptido a partir de la reacción. Y todo este proceso de las velocidades de las reacciones se fueron sacando con la ecuación de Michaelis-Menten y la ecuación de Lineweaver-Burkpara obtener como resultado las grafica.

Introducción. Teoría cinética de Michaelis-Menten de la acción enzimática: midiendo la velocidad inicial (v0) de una reacción en condiciones experimentales diferentes descubrieron que cuando se mantiene constante la concentración inicial del sustrato y se varia la cantidad de enzima, la velocidad observada es directamente proporcional a laconcentración de la enzima presente. En otros experimentos cuando la concentración de las enzimas se mantiene constante y se varía la cantidad de sustrato, la relación entre la velocidad inicial y la concentración del sustrato resulta ser hiperbólica.

Relación hiperbólica, relación entre la velocidad inicial y concentración del sustrato

En su teoría Michaelis y Menten propusieron que laenzima E se combina reversiblemente con el sustrato S para formar un complejo intermediario enzima sustrato ES, es cual se descomponía irreversiblemente para producir productos P y la enzima libre en su forma nativa. Cinéticamente hablando cada reacción se define por una constante específica de velocidad, designada como k1, k2 y k3.

Este modelo cinético adopta la hipótesis del estadoestacionario, según la cual la concentración del complejo enzima-sustrato es pequeña y constante a lo largo de la reacción. Por tanto, la velocidad de formación del complejo enzima-sustrato (v1) es igual a la de su disociación (v2+ v3): v1 = v2 + v3
Además, como [ES] es constante, la velocidad de formación de los productos es constante:
v = v3 = k3 [ES] = constante.
Como v1=v2+v3,podemos decir que: k1 [S] [ET] - k1 [S] [ES] = k2 [ES] + k3 [ES]
Despejando [ES], queda que:
En donde la expresión (k2+k3)/k1 se ha sustituido por KM, o constante de Michaelis-Menten
Si introducimos el parámetro Vmax en la ecuación general de la velocidad obtenemos la expresión más conocida de la ecuación de Michaelis-Menten:

CÁLCULO DE LA KM Y DE LA Vmax DE UN ENZIMA: La...