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APLICACIONES DE LA TECNICA DE SOUTHERN BLOT
IDENTIFICACIÓN DE SECUENCIAS (GENES, MUTACIONES..)
2. DETERMINACIÓN DEL NIVEL DE EXPRESIÓN GÉNICA
1. DESCUBRIMIENTO DE GENES
2. DIAGNÓSTICO DEENFERMEDADES
3. FARMACOGENÓMICA: DESARROLLO DE FÁRMACOS
4. TOXICOGENÓMICA: INVESTIGACIÓN TOXICOLÓGICAD
Tiene su principal aplicación en la confirmación de resultados obtenidos en la detección.
Latécnica southern blot consiste en la separación de fragmentes de ADN en geles de agarosa mediente la aplicación de corriente eléctrica en función del tamaño que posean estos fragmentos. Posteriormente losfragmentos separados son transferidos a membranas de nitrocelulosa o nylon, e incubados con sondas complementarias marcadas que permiten su identificación. De esta forma puede identificarse unfragmento especifico de ADN entre toda la población de fragmentos separados por electroforesis.
Esta técnica es aplicada comúnmente como método de análisis de ADN en laboratorios de investigación ya quepermite una detección con elevada sensibilidad. La detección de transgénicos y la identificación de especies es posible mediante esta técnica, aunque generalmente requiere un paso previo en el cual seproceda a la amplificación de la muestra mediante otros métodos que mencionaremos mas adelante.
VENTAJAS Y DESVENTAJAS
QUE VENTAJES PRESENTA ESTE METODO?
La preparación de las sondas no requiere unconocimiento previo de la secuencia del adn sometido a estudio
Aunque esta técnica es puramente cualitativa, se pueden obtener datos cuantitativos mediante el análisis de la intensidad de la señalasociada a la hibridación.
Cuales son sus desventajas?
Es una técnica laboriosa que requiere de cierto tiempo y esfuerzo.
Por otro lado, tiene las desventajasas típicas de los métodos de biologíamolecular que trabajan con ADN: fenómenos de reactividad cruzada, variabilidad entre secuencias, y además los resultados pueden verse influenciados por factores tales como el tejido de origen de la...