Southernn Blot

SOUTHERN BLOT
Southern blot, hibridación Southern o, simplemente, Southern es un método de biología molecular que permite detectar la presencia de una secuencia de ADN en una mezcla compleja de esteácido nucleico. Para ello, emplea la técnica de electroforesis en gel de agarosa con el fin de separar los fragmentos de ADN de acuerdo a su longitud y, después, una transferencia a una membrana enla cual se efectúa la hibridación de la sonda.

GRÁFICO DE LA TÉCNICA DE SOUTHER BLOT

Tipo de sonda que se emplea en esta técnica
Si se trata de DNA, la técnica se llama Southern blot. Seutilizan sondas de DNA (moléculas de DNA marcadas con radioactividad y con una secuencia conocida) para identificar qué bandas del gel contienen secuencias complementarias a la de la sonda.

Aplicacionesde la tecnica southern blot en medicina.
1. En el diagnóstico y caracterización de diversas inmunodeficiencias.
2. En la distrofia muscular de Duchenne.
3. En la hipoplasia adrenalcongénita la deficiencia de glicerol-quinasa.

Ventajas y desventajas de este método
Ventajas:
La preparación de la sonda no requiere un conocimiento previo de la secuencia de ADN sometido a estudio.Aunque esta técnica es puramente cualitativa, se puede obtener datos cuantitativos mediante el análisis de la intensidad de la señal asociada a la hibridación.
Desventajas:
Es una técnica laboriosaque requiere de cierto tiempo y esfuerzo.
Por otro lado, tiene las desventajas típicas de los métodos de biología molecular que trabajan con ADN: fenómeno de reactividad cruzada variabilidad entresecuencias, además los resultados pueden verse afectados por factores tales como el tejido de origen de la muestra o la forma en la cual ha sido procesada.


NORTHERN BLOT
Una técnica delaboratorio que se utiliza para identificar y localizar las secuencias de ARNm que son complementarias a un fragmento de ADN o ARN llamado sonda.  Northern blot o análisis Northern es básicamente una...