tarea de GENETICA PARA MA ANA 21 DE MAYO 15
Páginas: 4 (968 palabras)
Publicado: 28 de mayo de 2015
6.2. Electroforesis
La electroforesis se basa en el principio de que una molécula colocada
en un campo eléctrico migra al electrodo apropiado a una velocidad (movilidad
electroforética),proporcional al campo de fuerza y a su propia carga neta. Por
esta razón, una mezcla de moléculas de DNA (o de proteínas), puede separarse
electroforéticamente en función de: a) el tamaño, b) la forma oconformación
molecular y c) la magnitud de las cargas netas. Cuando se coloca una mezcla
de moléculas en la misma posición en un campo eléctrico, los componentes
individuales se resuelven en bandas discretasque migran en distintas
posiciones.
En soluciones acuosas en condiciones fisiológicas, los grupos fosfato
de los ácidos nucleicos se encuentran ionizados con una carga negativa
(aniones) por lo quemigrarán al electrodo positivo (ánodo), cuando son
sometidos a un campo eléctrico. Asimismo, al aumentar la viscosidad del medio
o soporte en el que migran las moléculas, las de menor peso molecularse
moverán con mayor facilidad que las de tamaños mayores, y así las moléculas
son separadas exclusivamente en función de su tamaño.
Los soportes más utilizados en los métodos de separación porelectroforesis son la agarosa y la poliacrilamida. La agarosa forma geles o
gelatinas al establecer puentes de hidrógeno cuando se encuentra en
soluciones acuosas frías; el tamaño del poro, a través del cualdeben migrar las
moléculas de ácidos nucleicos, depende directamente de la concentración de la
agarosa.
Para la migración de las moléculas de DNA en los geles de agarosa se
utilizan comúnmentecámaras de tipo horizontal (Figura 6.4). El gel se prepara
disolviendo la agarosa en una solución amortiguadora de Tris-Acetato-EDTA
(TAE), la cual consiste en Tris-Acetato (0.04 M) y EDTA (0.01 M). Lasolución
caliente se vacía al molde y se coloca un peine para generar pozos donde se
colocarán las muestras de DNA. Cuando el gel se encuentra sólido se retira el
peine y se adiciona solución TAE para...
La electroforesis se basa en el principio de que una molécula colocada
en un campo eléctrico migra al electrodo apropiado a una velocidad (movilidad
electroforética),proporcional al campo de fuerza y a su propia carga neta. Por
esta razón, una mezcla de moléculas de DNA (o de proteínas), puede separarse
electroforéticamente en función de: a) el tamaño, b) la forma oconformación
molecular y c) la magnitud de las cargas netas. Cuando se coloca una mezcla
de moléculas en la misma posición en un campo eléctrico, los componentes
individuales se resuelven en bandas discretasque migran en distintas
posiciones.
En soluciones acuosas en condiciones fisiológicas, los grupos fosfato
de los ácidos nucleicos se encuentran ionizados con una carga negativa
(aniones) por lo quemigrarán al electrodo positivo (ánodo), cuando son
sometidos a un campo eléctrico. Asimismo, al aumentar la viscosidad del medio
o soporte en el que migran las moléculas, las de menor peso molecularse
moverán con mayor facilidad que las de tamaños mayores, y así las moléculas
son separadas exclusivamente en función de su tamaño.
Los soportes más utilizados en los métodos de separación porelectroforesis son la agarosa y la poliacrilamida. La agarosa forma geles o
gelatinas al establecer puentes de hidrógeno cuando se encuentra en
soluciones acuosas frías; el tamaño del poro, a través del cualdeben migrar las
moléculas de ácidos nucleicos, depende directamente de la concentración de la
agarosa.
Para la migración de las moléculas de DNA en los geles de agarosa se
utilizan comúnmentecámaras de tipo horizontal (Figura 6.4). El gel se prepara
disolviendo la agarosa en una solución amortiguadora de Tris-Acetato-EDTA
(TAE), la cual consiste en Tris-Acetato (0.04 M) y EDTA (0.01 M). Lasolución
caliente se vacía al molde y se coloca un peine para generar pozos donde se
colocarán las muestras de DNA. Cuando el gel se encuentra sólido se retira el
peine y se adiciona solución TAE para...
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