Tecnicas De Microspopia Optica

TECNICAS DE MICROSCOPIA OPTICA
1.- Cita cinco tipos de colorantes y en qué estructura se utiliza
Un colorante es un cuerpo coloreado que puede comunicar su color a otro cuerpo.
La mayor parte de los colorantes artificiales (y aún los naturales como la hematoxilina), derivan de cuerpos incoloros, por ej. de carburos aromáticos.
La coloración es la propiedad que tienen ciertos cuerpos deejercer una absorción selectiva sobre la luz. Dicho de otra manera un cuerpo se ve de tal color porque trasmite por trasparencia o por difusión las radiaciones complementarias de las que él absorbe.
Tipos de coloraciones:
Directas: se producen por inmersión en el baño colorante.
Indirectas: en este tipo de coloración, el colorante no puede actuar directamente, el objeto que ha de colorearse debeser tratado de antemano por otra sustancia que lo prepare para admitir el colorante, esta se llama mordiente.

Clasificación de los colorantes:
Puede hacerse desde el punto de vista químico (por su naturaleza) o desde el punto de vista histológico (por su uso).Desde el punto de vista químico los colorantes se agrupan conforme a su constitución .Desde el punto de vista histológico se losclasifica en naturales y artificiales.
1-Hematoxilina: La hematoxilina es una sustancia capaz de colorear, extraída de la madera de un árbol conocido como árbol de Campeche, originario de Centroamérica.
La hematoxilina se expende en polvo, el cual es cristalino, casi incoloro o algo amarillento a veces más oscuro. La hematoxilina, como tal, aunque esté disuelta en agua o en alcohol de 96° o de 100°,es incapaz de colorear, para poder hacerlo, debe sufrir una oxidación.
Otras tinciones son :
2. Tionina
3. Safranina
4. Azul de toluidina
5. Azul de metileno

2.- Si nos saltáramos el paso por algún alcohol del proceso ¿qué ocurriría?
Los tejidos contienen grandes cantidades de agua, tanto intracelular como extracelular, que debe ser eliminada y reemplazada por parafina.
Una veztranscurrido el tiempo de fijación deseado es preciso detenerlo rápidamente.
El fijador que rodea la pieza puede ser eliminado por lavado en agua y alcohol.
Es imprescindible hacerlo después de la fijación con ácido crómico, bicromato de potasio y ácido ósmico. Se hace en agua corriente de 2 a 24 h.

b) Piezas que han estado en alcohol, ácido pícrico o formol, se llevan directamente al alcohol 70 o80%, llevándose así a cabo el lavado y el inicio de la deshidratación.
La deshidratación se realiza por medio de un reactivo anhidro pero con mucha agua. Puede utilizarse la acetona o el alcohol etílico (es el más utilizado).
La deshidratación se hace en forma progresiva con sucesivos baños de alcohol, cada vez menos
hidratados 70° – 80° – 90° – 96° – 100°.
Tiempos de permanencia en cadalíquido:
Alcohol 70…… las piezas pueden permanecer varios días.
Alcohol 96…… 2 baños en un lapso de 24 h.
Alcohol 100….. 3 baños de una hora c/u.
En cada etapa la cantidad de deshidratante debe ser superior a 10 veces el volumen del tejido por Deshidratar. Una mala deshidratación es siempre perjudicial por lo que es necesario controlar el resultado de la misma.
Los disolventes utilizados antes de laparafina son el xileno, benceno, tolueno, butilo, si la pieza ha sido mal deshidratada los líquidos se tornan opalinos.
desalcoholización permite que el alcohol de los tejidos sea reemplazado
por un líquido (solvente) que disuelva la parafina con la cual el tejido va a ser impregnado.
La parafina es un hidrocarburo sólido, con escasa elasticidad que ha de penetrar a los tejidos, ocupando hastasus últimos huecos. Para lo cual ha de licuarse mediante temperatura.
Esto es necesario ya que el medio de inclusión utilizado en forma rutinaria es la parafina. Por lo tanto, se pretende que la parafina se introduzca dentro de la muestra fijada. Pero la parafina no es soluble en agua y, la muestra, debe ser deshidratada primero.
Solventes:
Benceno – xileno – tolueno – cloroformo – fenol en...