Tecnico En Lab

CAP 1: TÉCNICAS MICROSCÓPICAS

TÉCNICAS MICROSCÓPICAS

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Lic. Carlos R. Neira Montoya
Lic. Eduardo Sedano Gelvet
Lic. María Elena Vilcarromero V.

El estudio de los tejidos tal como los observamos hoy en día no sería posible sin la ayuda de
la histotecnología; esta disciplina se encarga del estudio de los métodos técnicas y
procedimientos que permiten la transformación de un órganoen una película lo
suficientemente transparente y contrastada que nos permite su observación a través del
microscopio (Fig. 1-1). Para que esto ocurra se tiene que seguir una serie de pasos. Cada uno
de estos pasos permite la observación de las características morfológicas del tejido que nos
indica la normalidad o la alteración patológica; sin embargo en estudios mucho más
minuciosos, estospasos se harán en función de las estructuras o sustancias que se deseen
investigar en la muestra correspondiente.

Figura 1-1. Un órgano es transformado en una película transparente.

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Los pasos de las técnicas microscópicas para obtener un preparado histológico permanente
(láminas) son:
1. Toma de la muestra.
2. Fijación.
3. Inclusión.
4.Microtomía.
5. Coloración.
1.

TOMA DE LA MUESTRA

Es el momento que se selecciona el órgano o tejido a estudiar. De tres fuentes puede
provenir el material humano: las necropsias, las biopsias y las piezas operadas. De éstas, sólo
la primera puede darnos material normal; las dos últimas habitualmente proporcionarán
tejidos para estudio histopatológico.
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Necropsias: son las piezas quese obtienen de un cadáver. Para histología normal es
necesario que se trate de un cadáver fresco y que no haya sido atacado por ninguna
lesión, por lo menos el órgano que se quiere estudiar.

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Biopsias: son trozos de tejido que se obtienen de un sujeto con vida con el objeto de
estudiarlos al microscopio y efectuar un diagnóstico histopatológico.

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Piezas operadas: los tejidos quehan sido extraídos de las intervenciones quirúrgicas,
generalmente tumores u órganos inflamados, también pueden darnos material de
investigación pero, como en el caso anterior, servirán para estudio patológico, y en
pocas ocasiones se tendrá tejido normal.

2. FIJACIÓN
A fin de preservar la morfología de los tejidos y evitar la destrucción de las células por sus
propias enzimas (autolisis), opor bacterias (putrefacción), los tejidos extraídos de deben ser
fijados, inmediatamente después de ser obtenidos. Este tratamiento denominado fijación,
además tiene por finalidad endurecer los tejidos, volviéndolos más resistentes para las etapas
subsiguientes de las técnicas microscópicas (Fig. 1-2). El fijador más comúnmente utilizado es
el Formol, que es una solución de formaldehído enagua; sin embargo existen un sin número
de fijadores que se pueden usar en virtud de las estructuras que se deseen investigar en los
tejidos. En general los fijadores actúan reaccionando con las proteínas ya sea coagulándolas
o formando entre ellas puentes. Esta última es la forma como actúa el formol une diferentes
grupos químicos de las proteínas vecinas a través de puentes metileno (-CH2-),haciendo una
especie de gran malla donde quedan inmersas todos los otros elementos estructurales.

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Hay que considerar que la fijación es un paso fundamental, sino se ejecuta adecuadamente
se pueden perder o destruir algunas sustancias o se puede alterar la morfología del tejido.

Figura 1-2. Izquierda buena fijación, derecha mala fijación(líneas).

3. INCLUSIÓN
La inclusión tiene como finalidad conferirle al tejido un soporte sólido que permita
posteriormente realizar cortes muy finos, esto involucra que el medio usado no solo rodee el
tejido sino que penetre a las partes más intimas del tejido. El método de inclusión mas usado
es el de la parafina. La parafina es un hidrocarburo saturado, sólido a medio ambiente y que
necesita...