Tinción De Gram Modificada Brown- Brenn

Tinción de Gram Modificada Brown- Brenn
Puede ser ocupada tanto en tejidos frescos como en tejidos fijados con Formalina al 10%.
Propósito: Para demostrar gram-negativas y gram-positivos en eltejido
Reactivos:
• Cristal Violeta al 1%
• Lugol
• Acetona
• Fucsina básica al 0,25
• Ácido Pícrico - Acetona
Procedimiento
• Desparafinar e hidratar al agua destilada
• Tinción de CristalVioleta por 1 minuto
• Lavar en agua corriente
• Aplicar lugol por 1 minuto
• Lavar agua corriente
• Decolorar con alcohol-Acetona (saca el exceso del colorante Cristal Violeta)
• Lavar enagua corriente
• Tinción con Fucsina básica durante 3 minutos.
• Lavar en agua corriente, y secar levemente la muestra.
• Pasar rápidamente por 2 baños de acetona para iniciar la diferenciación dela fucsina.
• Pasar a la mezcla de Ácido Pícrico solución acetona al 0,1% (también actúa como diferenciador) hasta que aparezca un color rosado-amarillo en la muestra.
• Pasar por 2 cambios deacetona
• Secar al aire, pasar al xilol y cubrir con enteyan.

Resultados
Bacterias Gram positivas : azul
Bacterias Gram negativas: rojo
Núcleos: rojo
Fondo: Amarillo

Diferencias entreMétodo de Gram y el Método de Gram modificado o de Brown-Brenn.

• Una de las diferencias entre la tinción Gram común y la modificada de Brown –Bren es que en la primera sólo podemos ocupar tejido enfresco el cual se fija al portaobjetos mediante el calor. En cambio con la modificada se puede usar tanto tejido fresco como tejido previamente fijado y procesado con técnicas histológicas.
• Otra delas diferencias es en la composición de sus reactivos, la tinción de Gram común no utiliza ácido pícrico, en cambio en la modificada de Brown-Brenn sí. El ácido pícrico actúa como diferenciador ycolorante ya que en esta modificación de Gram deja un fondo de color amarillo.
• Otra de sus diferencias es que las muestras tratadas con el método de Gram no son sumergidas en un medio aclarante como...