Tincion Acido Resistente

I. Introducción
A diferencia de las tinciones simples, las tinciones diferenciales reaccionan de modo diferente con las distintas clases de bacterias y por lo tanto pueden ser empleadas para establecer una distinción entre ellas. Las tinciones diferenciales utilizadas con más frecuencia son la Tinción de Gram, estudiada en la práctica anterior, y la Tinción Ácido – Resistente que estudiaremos acontinuación. Este tipo de tinción es utilizada para el estudio y diagnóstico de enfermedades causadas por especies ácido-resistentes como los de la tuberculosis, y además para la tinción de estructuras resistentes como las endosporas bacterianas. Una endospora es una estructura especial, resistente y latente que se forma dentro de una célula y que protege a una bacteria de las condicionesambientales adversas. Las endosporas no se tiñen con los métodos comunes, como la tinción simple y la tinción Gram, porque estos colorantes no atraviesan sus paredes.
Esta tinción sirve principalmente para clasificar micobacterias y actinomicetos, que tienen un alto contenido en lípidos y en ácidos micólicos y que no pueden ser calificadas por la tinción de Gram. En el caso de las endosporas, laimportancia de su estudio radica en su patogenicidad, la endospora es resistente a la mayoría de agentes que matarían normalmente a las células vegetativas. Los productos de limpieza de la casa generalmente no producen ningún efecto, ni la mayoría de alcoholes, compuestos de amonio o de los detergentes, sin embargo el óxido de etileno es eficaz contra las endosporas. Los detalles de la endospora se hanestudiado extensivamente, especialmente el Bacillus subtilis. Estos estudios han contribuido al estudio de los genes, la transcripción y el factor sigma de la polimerasa del ARN.



II. OBJETIVOS
Distinguir a través de dos técnicas de tinción diferencial la presencia de endosporas bacterianas y diferenciarlas de las estructuras vegetativas normales.

III. MARCO TEÓRICO
Algunas bacterias, soncapaces de producir formas de resistencia a través de un proceso llamado esporulación. Este proceso de diferenciación, esta está codificando genéticamente y permite a los microorganismos sobrevivir hasta que las condiciones exteriores sean favorables 8para el desarrollo (Stainer 1991)
Los géneros de bacteria capaces de esporular hasta ahora descriptos son Bacillus, Clostridium y Sporosarcina, por locual la presencia de esporos en una bacteria es de gran utilidad taxonómica. Estructuralmente, los esporos bacterianos están rodeados por gruesas envolturas y tienen muy bajo contenido de agua. El córtex o corteza, está compuesto por un peptidoglicano que contiene menos enlaces cruzados que el correspondiente a la pared celular. La cubierta está formada por una proteína del tipo de la queratina congran cantidad de puentes disulfuro. Esta capa es fundamental para la resistencia del esporo a los agentes físicos y químicos.
El exosporium es de naturaleza lipoproteica. Asimismo poseen en su composición química, una alta concentración de dipicolinato de calcio, que es una sustancia que no se encuentra en las células vegetativas, y que estaría involucrada en la eliminación de agua durante elproceso de esporulación. (Joklik 1983)









Las características antes apuntadas, dan cuenta de la resistencia de los esporos a los agentes físicos y químicos y de la dificultad que presentan para ser coloreados. Cabe aclarar que una vez coloreados son difíciles de decolorar.
Para la coloración de esporos según Dorner, se sensibiliza y colorea al esporo con fucsina fenicada en caliente yluego se extiende sobre nigrosina. La nigrosina extraerá el colorante de todas las estructuras celulares excepto de los esporos y por consiguiente, se verán los esporos rojos, el resto de la bacteria incolora y el fondo oscuro. Si bien es cierto que con otras coloraciones los esporos se verán incoloros, en algunos casos las bacterias pueden presentar zonas sin colorear que no corresponden a...