tINCION DE GRAM

TINCIÓN DE GRAM
OBJETIVO.-
La tinción de gram o coloración gram es un tipo de tinción diferencial empleadas en microbiología para visualización de bacterias, sobre todo en muestras clínicas. Debesu nombre al bacteriólogo danés Christian Gram, que desarrollo la técnica en 1884. Se utilizó tanto para poder referirse a la morfología celular bacteriana como para poder realizar una primeraaproximación a la diferenciación bacterias , considerándose bacteria gram positiva a las bacterias que visualizan de color violeta, y bacteria gram negativa a las que se visualizan de color rosa.PROCEDIMIENTO.-
 Recoger muestra.
 Hacer el extendido en espiral.
 Dejar secar a temperatura ambiente.
 Fijar la muestra con metanol durante un minuto o al calor (flameado tres veces aproximadamente).
Agregar azul violeta (cristal violeta o violeta de genciana) y esperar un minuto. Todas las células gram positivas y gram negativas se tiñen de color azul purpura.
 Enjuagar con agua.
 Agregarlugol y esperar entre 30 segundos y 3 minutos.
Enjuagar con agua.
 Agregar acetona y/o alcohol y esperar entre 15 y 20 segundos.
 Enjugar con agua.
 Tinción de contraste agregando Safranina oFucsina básica y esperar 1-2 minutos. Este tinte dejará de color rosado- rojizo las bacterias gram negativas.
 Enjuagar con agua.


GÉNERO ESTREPTOCOCOS
OBJETIVO.-
Observar las característicastintoriales y morfológicas de los estreptococos, el desarrollo, color, tamaño, hemolisis de las colonias, prueba de identificación de las principales especies: Streptococcus pyogenes, Streptococcuspneumoniae y Streptococcus agalactiae.
PROCEDIMIENTOS.-
A partir de una suspensión bacteria del Streptococcus o a partir de un cultivo primario sembrar en el medio de agar sangre ya agar chocolatemediante estrías y agotamiento.
Incubar a 35ºC durante 18- 24 horas en ambiente de 5- 10 % de CO2 (esto se puede lograr introduciéndolas cajas Petri en una lata metálica con una vela encendida...