Tincion de Gram

Materia: Laboratorio de microbiología
Fecha: 16/09/2013

Tinción de Gram
I.

Introducción

El tamaño de las bacterias impide verlas a simple vista, sin embargo, las colonias que se
forman en medios solidos si son visibles, de esta manera se puede hacer una observación a
simple vista o macroscópica, en las colonias se puede estudiar una serie de características
que nos ayudan a unaligera identificación, como a nivel morfológico (forma de las
colonias), elevación, margen o borde y color de las colonias; es decir que por medio de una
observación macroscópica no se puede identificar al tipo de bacterias, es por esto que se
debe realizar una observación microscópica.
Ramos y Pérez (2004), las células microbianas se reproducen habitualmente con tal rapidez
que en 18-24 horasdan lugar a la aparición de masas visibles de células sobre medios
solidos que se denominan colonias. Cada colonia se considera que está formada por un
único tipo de microorganismo. Las colonias tienen una morfología característica que se
estudia a simple vista con la ayuda de una lupa. Las características más importantes de las
colonias y cuyo estudio tiene interés en la caracterización son lossiguientes:
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Forma: puede ser puntiforme, circular, irregular, filamentosa, rizoide u ovalada.
Tamaño: se mide en mm. Se dice que es puntiforme si mide menos de 1mm.
Elevación: vistas de perfil las colonias pueden ser plana, elevada (o en relieve),
convexa, pulvinada (más elevada que convexa), mamelonada (con una
protuberancia central), o umbilicada (con una depresióncentral).
Forma del borde: puede ser entero, ondulado, lobulado, dentado (o aserrado),
filamentoso y rizado.
Superficie: puede ser lisa, rugosa, mate, brillante, transparente u opaca.
Color: presencia de colores característicos y difusión de pigmentos en el medio.
Capacidad de emulsión en agua: puede formar una suspensión uniforme, formar una
suspensión grumosa o no se emulsiona.

En estelaboratorio solo se tomó en cuenta la forma, borde, elevación y color.
La observación microscópica es una de las características de la microbiología y aunque es
posible observar ciertos microorganismos sin colorear (por ejemplo protozoarios), en el
caso de las bacterias es necesario la coloración de los preparados para aumentar el contraste
con el fondo. Existen diversos métodos de coloraciónpara una observación microscópica,
como ser: tinción de Ziehl Neelsen, coloración de esporas, coloración de flagelos, tinción
de Gram, y muchos otros, el que nosotros realizamos fue el último.
Según Garcia (2010) las referencias a la morfología celular bacteriana (cocos, bacilos,
positivos, negativos, etc.) se basan en la tinción de Gram. Sobre la base de su tinción de

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Gram, las bacterias pueden dividirse en dos grupos, Gram positivas y Gram negativas (en
este caso, los términos positivo y negativo no tienen que ver con la carga eléctrica, sino
simplemente designan dos grupos morfológicos distintos de bacterias).
Las Bacterias Gram positivas y Gram negativas tiñen de forma distinta debido a las
diferenciasconstitutivas en la estructura de sus paredes celulares. La pared de la célula
bacteriana sirve para dar su tamaño y forma al organismo.
García (2010), el material de la pared celular bacteriana que confiere rigidez es el
peptidoglicano. La pared de las células Gram positivas es gruesa y consiste en varias capas
interconectadas de peptidoglicano así como algo de ácido teicoico, generalmente, 80% a
90%de la pared de la célula Gram positiva es peptidoglicano. La pared de la célula Gram
negativa, por otro lado contiene una capa mucho más delgada únicamente de
peptidoglicano y está rodeada por una membrana exterior compuesta de fosfolípidos,
lipopolisacaridos y lipoproteínas. Solo de un 10% a 20% de la pared de la célula Gram
negativa es peptidoglicano.
Las células Gram positivas, a causa de...