Tincion de Gram

Tinción de Gram
•Desarrollada por el bacteriólogo ChristianGram en 1884•Permite la rápida evaluación de morfología y complejidad bacteriana•Tinción rápida y Económica•Puede variar según elprotocolo usado(necesidad de estandarizar el protocolo)
Portaobjetos Agua destilada Pipetas Pasteur, haza, Mechero. Cristal Violeta Lugol Alcohol acetona Safranina (u otra tinción de contraste)
Colocaruna pequeña gota de Agua destilada en el portaobjetos (con pipeta por ejemplo) Re-suspender muestra en el portaobjetos. Secar al mechero. La gota de agua debe Se debe calentar por 5 ser pequeña minaprox, hasta que toda el agua se seque.
Se debe colocar Cristal Violeta cubriendo toda la muestra por 1min (variable según lab.) Se lava con agua corriente Puede hacerse con gotario o pizeta Luegodebe agregarse el lugol. Este debe aplicarse como el cristal violeta y también debe cubrir la muestra por 1 min. Luego se lava con agua corriente.
El cubrir la muestra con alcohol acetona paradecolorarla es el paso más critico del procedimiento. Este debe cubrir la muestra por el tiempo que puede ir de 15s a 30s según corresponda y la reacción debe ser detenida con el lavado con agua corriente. Eltiempo debe ser el mismo para todas las muestras. Al ser tiempos por lo general muy cortos, se recomienda agregar el alcohol mientras ya se tiene la llave del agua corriendo, listo para el lavado.El último paso consiste en agregar una tinción de contraste, para teñir las bacterias que pierden el cristal violeta. Para esto se agrega safranina cubriendo la muestra por 15s o por 1min,dependiendo. Luego se lava con agua corriente y se deja secar.
Bacterias Gram positivas: ◦ Corresponden a las bacterias que mantienen la coloración del cristal violeta después del alcohol acetona, lo que lesda un color violeta/morado. Streptococcus pneumoniae Bacteria Gram positiva, desde cultivo bacteriano en agar sangre.
Bacterias Gram negativas: ◦ Corresponden a las bacterias que pierden la...