Unidad tematica I: Fundamentos de recombinacion genetica

Universidad de Santiago de Chile – Facultad de Química y Biología
Licenciatura en Bioquímica

Unidad temática I
Fundamentos de recombinación génica

Integrantes:

Denisse Mena
Nayra Muñoz

Profesor:

Dr. Renato Chávez R.

Asignatura:

Laboratorio de Genética

Fecha de entrega: 00/10/2012

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Licenciatura enBioquímica

Introducción
Uno de los modelos más utilizados en laboratorios para el estudio genético es el hongo o moho
rojo del pan, Neurospora crassa, el cual es un organismo haploide en la mayor parte de su ciclo de
vida, lo que facilita bastante la realización de dicho análisis genético, puesto que dicha haploidia
elimina el problema de la dominancia que pudieran presentarse en otros modelos,ya que los
genes recesivos no son “ocultados” por los genes dominantes ocasionando que el genotipo del
individuo se exprese a cabalidad. Este hongo es principalmente empleado en análisis de
entrecruzamiento genético, siendo una de las pautas iniciales para la construcción de mapas de
ligamiento [1].
Esta especie heterotalia presenta un ciclo vegetativo y otro sexual, los cuales estáníntimamente
relacionados en el ciclo de vida de este hongo [2]. En dicho ciclo podemos apreciar estructuras
tales como los micelios, los cuales son una masa de hifas o filamentos unicelulares que se
ramifican y crecen con mucha rapidez, este constituye el cuerpo vegetativo del hongo y produce
las esporas asexuales, más bien conocidas como conidios, los cuales se fusionan permitiendo que
dos núcleoshaploides se unan y generen mediante una división meiotica y mitótica siguiente la
estructura conocida como asca, la que generalmente posee en su interior ocho esporas sexuales o
ascosporas. Las ascas generalmente se reúnen de seis al interior del peritecio, estructura esférica
que libera las ascas y por consiguiente, las ascosporas, al romperse durante su madurez [3].

Figura 1: Ciclo de vidade la Neurospora crassa

La Neurospora crassa crece normalmente in vitro sobre un medio mínimo que contiene solamente
una fuente de carbono y nitrógeno, sales inorgánicas y la vitamina biotina, gracias a dicho
crecimiento en medio mínimo se puede detectar mutaciones nutricionales presentes en dicha
especie, puesto que solo las cepas de Neurospora crassa “normales” pueden subsistir ydesarrollarse en dicho medio mientras que las cepas mutantes de dicho hongo necesitaran de un
medio completo, el cual posee todos los nutrientes necesarios para que esta pueda desarrollarse,
reproducirse y crecer adecuadamente [1].Una de las mutaciones más reconocidas de esta especie
es la denominada mutación ws-1, la cual es responsable de que la Neurospora sea incapaz de
sintetizar melanina, locual se expresa fenotípicamente en el impedimento del desarrollo de la

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coloración negra de las ascosporas, por lo tanto tendremos que las cepas que presenten dicha
mutación poseerán ascosporas incoloras, fácilmente distinguibles de la ascospora nativas de cierta
tonalidad oscura [4].
Existen dostipos sexuales en la Neurospora crassa, los cuales están determinados por los alelos A
y a de un determinado gen, en donde el cruzamiento genético solo será factible y podrá tener
existo si es del tipo: A x a [4]. Para que se establezca un cruzamiento genético in vitro de dichas
Neurosporas existen ciertas técnicas de cruzamiento que se pueden realizar, entre las cuales
podemos encontrar elcruzamiento reciproco y el de lado a lado. El cruzamiento reciproco consiste
en inocular en tubos separados cepas de Neurospora de sexo opuesto, esperando a que se
desarrollen los protoperipecios en cada muestra para poderlos rociar con conidios de sexo
contrario; mientras que el cruzamiento que se produce de lado a lado permite incubar
simultáneamente las cepas de sexo opuesto de esta especie...