Anticuerpos monoclonales
Páginas: 11 (2659 palabras)
Publicado: 8 de junio de 2010
ANTICUERPOS MONOCLONALES UTILIZADOS EN RADIODIAGNOSTICO Y RADIOTERAPIA
Autor: César Contreras Acuña
Colaborador: Andrés Vásquez Arriaza
Sistema inmunológico
El sistema inmunológico tienen un sólo objetivo; distinguir entre lo propio y lo no propio.
El sistema inmunológico realiza dos estrategias
La respuesta humoral
La respuesta mediada por células
Anticuerpos
Los elementos dereconocimientos de la respuesta humoral están constituidos por proteínas solubles, denominadas anticuerpos, que son producidos por células plasmáticas.
Los anticuerpos tienen principalmente dos funciones:
1) reconocer y unirse a blancos específicos, los antígenos 2) inducir acciones secundarias realizadas por el sistema del complemento y células fagocitarias.
Existen cinco subtipos deanticuerpos:
IgA, IgD, IgE, IgG e IgM.
Estos subtipos varían en la estructura y en el peso molecular.
El tipo más ligero es el de las IgG, con peso molecular de aproximadamente 150 kD (monómero).
Los anticuerpos están formadas por dos parejas de cadenas peptídicas que difieren en el peso molecular;
cadenas pesadas
cadenas ligeras.
En el amino terminal del anticuerpo se localiza la regiónvariable.
Dentro de cada región variable existe una región hipervariable, responsable de unirse al antígeno; epitopo.
La digestión de anticuerpos con determinados enzimas (papaína) produce dos tipos de fragmentos proteicos:
Fragmento cristalizable, Fc, sin capacidad de unión al antígeno.
Fab (Fragment antigen-binding).
Respuesta policlonal - diferentes clones de linfocitos B producendistintos anticuerpos frente a varios epitopos, con diversas afinidades.
Un anticuerpo monoclonal corresponde al producido por un único clon específico de linfocito B, pertenece a una clase y subclase determinada y tiene una especificidad única frente a un epitopo de un antígeno determinado.
La expresión de marcadores específicos proviene de la posibilidad de que se puedan generar anticuerposcapaces de distinguir entre células malignas y normales.
La mayoría de las diferencias radica en la expresión alterada de constituyentes celulares normales.
La mayoría de los marcadores son por lo tanto no específicos de una neoplasia, sino más bien asociados a una neoplasia.
Los anticuerpos que reconocen antígenos asociados a neoplasias pueden ser utilizados para dirigir radionúclidos uotros agentes tóxicos in vivo para propósitos diagnósticos y terapéuticos.
Producción de anticuerpos monoclonales
Sensibilización de un animal de laboratorio al que se le inyecta el antígeno frente al que se pretende desarrollar el correspondiente anticuerpo.
Extirpación el bazo (fuente primaria de linfocitos B).
Linfocitos B y células de mieloma son fusionados in vitro.
El resultado es unHIBRIDOMA, con capacidad de producir de un anticuerpo determinado y de reproducición indefinida.
Una vez formados los hibridomas, la secuencia continúa a través de un triple proceso, consistente en selección, investigación y clonación.
Selección
CARACTERIZACIÓN DE LOS ANTICUERPOS MONOCLONALES
Asegurar que el anticuerpo todavía sigue siendo específico para el antígeno de interés (mutacionesespontáneas)
Determinar el grado de reacción cruzada (técnica inmunohistoquímica).
La reactividad cruzada in vitro no siempre implica completa congruencia in vivo.
Otro parámetro importante a considerar en la utilización de anticuerpos monoclonales, son las características del radioisótopo y la afinidad al antígeno.
Radionúclidos de interés para la marcación de anticuerpos
Anticuerposmarcados con yodo radiactivo
El I-125 y I-131 tienen las ventajas de ser económicos y de gran accesibilidad.
Eficiencia de unión 70 a 80 %.
La concentración de yodo debe ser alta para asegurar un nivel de eficiencia satisfactorio en la marcación.
Anticuerpos marcados con In-111
Con el In-111 las imágenes pueden ser obtenidas mucho tiempo después (vida media larga).
Unión al anticuerpo...
Autor: César Contreras Acuña
Colaborador: Andrés Vásquez Arriaza
Sistema inmunológico
El sistema inmunológico tienen un sólo objetivo; distinguir entre lo propio y lo no propio.
El sistema inmunológico realiza dos estrategias
La respuesta humoral
La respuesta mediada por células
Anticuerpos
Los elementos dereconocimientos de la respuesta humoral están constituidos por proteínas solubles, denominadas anticuerpos, que son producidos por células plasmáticas.
Los anticuerpos tienen principalmente dos funciones:
1) reconocer y unirse a blancos específicos, los antígenos 2) inducir acciones secundarias realizadas por el sistema del complemento y células fagocitarias.
Existen cinco subtipos deanticuerpos:
IgA, IgD, IgE, IgG e IgM.
Estos subtipos varían en la estructura y en el peso molecular.
El tipo más ligero es el de las IgG, con peso molecular de aproximadamente 150 kD (monómero).
Los anticuerpos están formadas por dos parejas de cadenas peptídicas que difieren en el peso molecular;
cadenas pesadas
cadenas ligeras.
En el amino terminal del anticuerpo se localiza la regiónvariable.
Dentro de cada región variable existe una región hipervariable, responsable de unirse al antígeno; epitopo.
La digestión de anticuerpos con determinados enzimas (papaína) produce dos tipos de fragmentos proteicos:
Fragmento cristalizable, Fc, sin capacidad de unión al antígeno.
Fab (Fragment antigen-binding).
Respuesta policlonal - diferentes clones de linfocitos B producendistintos anticuerpos frente a varios epitopos, con diversas afinidades.
Un anticuerpo monoclonal corresponde al producido por un único clon específico de linfocito B, pertenece a una clase y subclase determinada y tiene una especificidad única frente a un epitopo de un antígeno determinado.
La expresión de marcadores específicos proviene de la posibilidad de que se puedan generar anticuerposcapaces de distinguir entre células malignas y normales.
La mayoría de las diferencias radica en la expresión alterada de constituyentes celulares normales.
La mayoría de los marcadores son por lo tanto no específicos de una neoplasia, sino más bien asociados a una neoplasia.
Los anticuerpos que reconocen antígenos asociados a neoplasias pueden ser utilizados para dirigir radionúclidos uotros agentes tóxicos in vivo para propósitos diagnósticos y terapéuticos.
Producción de anticuerpos monoclonales
Sensibilización de un animal de laboratorio al que se le inyecta el antígeno frente al que se pretende desarrollar el correspondiente anticuerpo.
Extirpación el bazo (fuente primaria de linfocitos B).
Linfocitos B y células de mieloma son fusionados in vitro.
El resultado es unHIBRIDOMA, con capacidad de producir de un anticuerpo determinado y de reproducición indefinida.
Una vez formados los hibridomas, la secuencia continúa a través de un triple proceso, consistente en selección, investigación y clonación.
Selección
CARACTERIZACIÓN DE LOS ANTICUERPOS MONOCLONALES
Asegurar que el anticuerpo todavía sigue siendo específico para el antígeno de interés (mutacionesespontáneas)
Determinar el grado de reacción cruzada (técnica inmunohistoquímica).
La reactividad cruzada in vitro no siempre implica completa congruencia in vivo.
Otro parámetro importante a considerar en la utilización de anticuerpos monoclonales, son las características del radioisótopo y la afinidad al antígeno.
Radionúclidos de interés para la marcación de anticuerpos
Anticuerposmarcados con yodo radiactivo
El I-125 y I-131 tienen las ventajas de ser económicos y de gran accesibilidad.
Eficiencia de unión 70 a 80 %.
La concentración de yodo debe ser alta para asegurar un nivel de eficiencia satisfactorio en la marcación.
Anticuerpos marcados con In-111
Con el In-111 las imágenes pueden ser obtenidas mucho tiempo después (vida media larga).
Unión al anticuerpo...
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