Casos Clinicos en Banco de Sangre

ESCUELA DE TECNOLOGÍA MÉDICA
BANCO DE SANGRE
LABORATORIO INMUNOHEMATOLOGÍA

Determinación del Genotipo Rh y Antígeno D débil
Para la clasificación sanguínea de rutina sólo se determina la presencia o ausencia del antígeno D, pero
también se pueden determinar la presencia de otros antígenos en situaciones especiales como por ejemplo:
Investigación de Enfermedad Hemolítica del Recién Nacido.Identificación de anticuerpos irregulares.
Preparación de células para un panel de detección de anticuerpos.
Para preparar células en control de calidad de técnicas inmunohematológicas.
En la selección de sangre compatible para un paciente con Anticuerpos anti-Rh; este proceso es más confiable
que la prueba cruzada.
Muestra:
Sangre con anticoagulante EDTA
Método:
Se utiliza suerosmonoclonales IgM anti-D, anti-C, anti-E, anti-c, anti-e. Seguir las instrucciones del fabricante, tanto
en el tiempo como la temperatura de incubación.
Se recomienda usar controles positivos para cada antígeno que se presenten en forma homocigota, y controles
negativos.
Procedimiento:
1.
2.
3.
4.
5.

Rotular 5 tubos Kahn, limpios, D, C, c, E, e, colocar 1 gota de suero anti-D, anti-C, anti-c,anti-E, anti-e segun
corresponda.
Agregar 1 gota de de suspensión al 5% en solución salina de glóbulos rojos en estudio a los tubos (idealmente
utilizar muestra propia para conocer su genotipo).
Centrifugar para lectura (según sea la calibración de la centrífuga en uso). Resuspender las células con suavidad
y examinar en busca de aglutinación, registrar los resultados positivos y negativos.Anotar la presencia o no de los antígenos y construir todos los fenotipos posibles.
Según las frecuencias obtenidas calcular el genotipo más probable.

Interpretación:
La presencia de aglutinación en el tubo de la muestra en estudio, evidenciará la existencia del antígeno específico.
Cálculo del Genotipo más probable:
La frecuencia de un alelo es la proporción que contribuye al conjuntototal de alelos en una población dada. La
suma de las frecuencias alélicas debe ser igual a 1.
Para realizar este cálculo se debe revisar la frecuencia de los haplotipos Rh en la población en estudio (en este caso
la chilena) y basarnos en la Ley de Hardy-Weinberg (cuando las frecuencias alélicas no varían de una generación a
otra).
Si se desea calcular por ejemplo: La frecuencia en Chile delgenotipo CDe/cde,
Calcular:
En el caso de ser heterocigoto, como este ejemplo:
2 X (CDe) (cde) = 2(0.500 X 0.2192) = 0.22, es decir 22%

En el caso de ser homocigoto, la fórmula es por ejemplo: para DCe/DCe,
Se debe calcular (0.5001) x (0.5001)= 0.25, es decir 25%

FRECUENCIA DE LOS HAPLOTIPOS EN LA POBLACION CHILENA
Antígenos

Fenotipo

Frecuencia

DCE

Rz

0,0132

DCe

R10,5001

DcE

R2

0,2259

Dce

R0

0,0255

dCE

ry

0,0000

dCe

r´

0,00648

dcE

r´´

0,0097

dce

r

0,2192

Investigación de la variante Du.
Algunos glóbulos rojos expresan los antígenos D en forma tan débil que la mayoría de los reactivos anti-D solo se
aprecia menor medida mediante la prueba antiglobulínica indirecta, después de incubar los glóbulosrojos con antiD.
Muestra:
Sangre con anticoagulante EDTA.
Reactivos:
1. Reactivos anti-D: los apropiados incluyen agentes hiperproteicos modificados policlonales, hipoproteicos
mono/policlonales, pero es preciso saber las especificaciones al respecto de los reactivos. No todos los
reactivos son adecuados para evaluar los D débil, porque las reacciones no son confiables o porque el
reactivocontiene otros anticuerpos que reaccionan cuando se agrega suero antiglobulínico.
2. Reactivo antiglobulínico humano poliespecífico o anti-IgG.
3. Células control de coombs.
Procedimiento en tubo:
1. Colocar 2 gota de suero anti-D en un tubo Kahn limpio y rotulado.
2. Agregar 1 gota de suspensión al 5% en solución salina de glóbulos rojos en estudio.
3. Mezclar e incubar el tubo de acuerdo...