cultivo de celuas

4.- Cultivo in vitro

28

4.- CULTIVO IN VITRO
4.1. CULTIVO DE CÉLULAS Y TEJIDOS VEGETALES: GENERALIDADES
Debido al incremento de la población mundial, en los últimos años se ha acentuado el
interés por la biotecnología vegetal con el propósito de producir alimentos, mejorar
cultivares, adaptarlos a diferentes condiciones climáticas y edafológicas y obtener
metabolitos de interéscomercial (Pérez Ponce, 1998).
En este contexto, el cultivo de tejidos vegetales ha merecido especial atención
debido a que comprende un grupo heterogéneo de técnicas que permiten el cultivo en
condiciones asépticas de órganos, tejidos o células en un medio de composición química
definida e incubados en condiciones ambientales controladas (Roca & Mroginski, 1991;
Pérez Ponce, 1998).
Las razones quedeterminan que el cultivo in vitro de células y tejidos vegetales
constituya una tecnología interesante para la producción de plantas y productos naturales
de interés, son las siguientes: 1) la producción de plantas de sanidad controlada, lo que
permite incrementos en los rendimientos, 2) la independencia del clima, suelo,
distribución geográfica y problemas socio-políticos, 3) la capacidadde establecer un
sistema de producción definido, en relación a las demandas del mercado, 4) el cultivo de
especies no domesticadas y/o difíciles de cultivar a campo, 5) la conservación del
germoplasma de plantas de interés comercial o en vías de extinción, 6) la posibilidad de
establecer programas de mejoramiento genético, más rápidos que en los cultivos
tradicionales, por técnicasbiotecnológicas e ingeniería genética, 7) la producción de
compuestos químicos conocidos provenientes de plantas de crecimiento lento o difíciles
de obtener por extracción o por síntesis química, 8) la síntesis de nuevos productos
químicos expresados únicamente en los cultivos in vitro, 9) la obtención de enzimas y
sistemas de biotransformaciones para ser usados solos o combinados con síntesis
química y10) la producción de plantas transgénicas resistentes a patógenos, a herbicidas
o a estrés abiótico, con mejor calidad nutricional, que actúen como biorreactores en la
producción de proteínas, carbohidratos o lípidos o que secuestren metales pesados de
suelos contaminados, entre otras aplicaciones.

4.1.1. Medios de cultivo
Aunque actualmente se cuenta con una literatura detallada detécnicas de cultivos
vegetales in vitro, con los protocolos correspondientes a muchas especies vegetales
(Dixon, 1985; Vidalie, 1986; Conger, 1987; Bajaj, 1988; Pollard & Walker, 1990; Roca &
Mroginski, 1991), existen especies en las cuales el establecimiento, multiplicación y/o

4.- Cultivo in vitro

29

enraizamiento de los cultivos es dificultoso y se requiere una intensa tarea experimentalpara lograr su micropropagación o para obtener callos o suspensiones capaces de
producir los metabolitos deseados.
Los medios nutritivos para el cultivo de células y tejidos vegetales son, en general,
menos complejos que los de cultivos microbianos y son formulados en forma más o
menos empírica. Si bien se desarrollan periódicamente nuevas fórmulas comerciales, no
existe hasta el presente undiseño racional que tenga en cuenta la composición
centesimal de la célula vegetal y el conjunto de condiciones que controlan el crecimiento
y la diferenciación. No obstante, normalmente se puede utilizar un medio sencillo y
complementarlo con diferentes componentes y reguladores de crecimiento para llegar
empíricamente a la fórmula que le brinde al tejido las mejores condiciones para sucrecimiento y producción (Krikorian, 1991).
Se han descripto un gran número de medios nutritivos para el cultivo de vegetales
in vitro (Heller, 1953, 1954; Murashige & Skoog, 1962; Gamborg, 1968 y 1970; Schenk &
Hildebrandt, 1972; De Fossard, 1976). Estos medios de cultivo constan de sales
minerales, vitaminas, aminoácidos, azúcares y reguladores de crecimiento.
La composición mineral se...