DETERMINACION DE CIDO RICO Y SUS PARAMETROS

DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO Y SUS PARÁMETROS
El ácido úrico en los mamíferos es el metabolito final del catabolismo de las bases púricas y su elevación está asociada a la gota, es decir, los reumatismos hiperuricémicos. En los pacientes con tal disfunción, aparecen cristales de ácido úrico en las articulaciones y en los tendones, lo que origina las manifestaciones reumáticas características.Su importancia radica no tanto para medir la función renal, sino que su utilidad es para identificar a personas con riesgo de padecer gota, de producción de cálculos de ácido úrico, y para el seguimiento del tratamiento. Se encuentra en sangre y  orina como el producto de desecho final del metabolismo de las purinas dietéticas y endógenas. 
Aunque los valores elevados de ácido úrico se asociantradicionalmente con gota, se ha notado que es muy común en pacientes hospitalizados con azoemia por enfermedad renal.  Es más común encontrar valores aumentados que disminuidos. Los valores disminuidos tienen poco significado clínico aunque puede bajar antes de un ataque agudo de gota.
Niveles altos de ácido úrico están también asociados a patología renal por retención de productos nitrogenados,asociándose en estos casos a valores también altos de urea y de creatinina.
Los desordenes que transcurren con ácido úrico elevado pueden deberse a tres razones:
Aumento de ingesta de purinas. Esta condición raramente produce estados hiperuricémicos, pero es importante en personas con gota u otros estados hiperuricemiantes
Excreción disminuida. En estado de disfunción renal aumenta al igual que lacreatinina y el nitrógeno ureico, pero es poco sensible, por lo que no se utiliza para el diagnóstico de disfunción renal.
Incremento en la producción. Aquí entra la gota como enfermedad y los síndromes gotosos o gota secundarias provocados por aumento de lisis celular. En este caso, está aumentada su concentración en orina y hay riesgo de producción de cálculos.
El ácido úrico es oxidado por lauricasa a alantoína y peróxido de hidrógeno que en presencia de POD y 4-aF y DCPS forma un compuesto rosáceo.

Uricasa
ác. úrico + 2H20 + 02 alantoína + CO2 + 2H202
POD
2H202 + 4aF + DCPS Quinona + 4H20
4-aF = 4 aminofenazona
DCPS = 2,4,diclorofenol sulfonato
Guardar en refrigeración a 2-8 ºC. Estos productos son, solamente, para usode laboratorio y pruebas "in vitro".
MATERIAL
1. Materiales para punción venosa ( jeringa, torundas, ligadura, tubo sin anticoagulante) o materiales para realizar la punción con vacutainer.
2. Espectrofotómetro
3. Tubos de ensaye (para depositar la muestra y reactivos)
4. Pipeta
6. Reactivo de acido úrico
7. Reactivo de estándar

TÉCNICA
1. Equilibrar reactivos y muestras a temperatura ambiente.2. Pipetear en tubos rotulados:
TUBOS
Blanco
Muestra
CAL.Patrón
R1.Monoreactivo Muestra
CAL.Patrón
1,0 mL
−
−
1,0 mL
25 μL
−
1,0 mL
−
25 μL

3. Mezclar y reposar los tubos 10 minutos a temperatura ambiente ó 5 minutos a 37ºC.
4. Leer la absorbancia (A) de la muestra y el patrón a 520 nm frente al blanco de reactivo.
El color es estable como mínimo 30 minutos protegido de la luz.

CÁLCULOSA Muestra
________ x C PATRÓN = mg/Dl ácido úrico
A Patrón
Muestras con concentraciones de ácido úrico superiores a 20 mg/dL deben diluirse 1:5 con solución salina y repetir el ensayo. Multiplicar los resultados por 5.
Para expresar los resultados en unidades SI aplicar: mg/dL x 59,5 = μmol/L
MUESTRA: Suero, plasma u orina. Suero, plasma u orina recogidos mediante procedimientosestándar. Diluir la orina 1/10 con agua destilada antes del ensayo.
El ácido úrico en suero o plasma es estable 7 días a 2-8ºC. Los anticoagulantes como la heparina, EDTA, oxalato o fluoruro no interfieren.
El ácido úrico en orina es estable 4 días a temperatura ambiente si se ajusta el pH a > 8 con NaOH. No refrigerar.
Orina: Diluir la orina al 1:10 con agua destilada, mezclar y seguir la técnica....