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MICROPROPAGACIÓN
1. Introducción.
La microspropagación consiste en la propagación de un genotipo a gran
escala a través del empleo de técnicas de cultivo “in vitro”.
El cultivo es una herramienta para el mejoramiento ya que se producen
plantas de calidad uniforme a escala comercial, a partir de un genotipo
selecto y con una tasa de multiplicación ilimitada.
Esto es posible gracias a la propiedadde totipotencia que tienen las células
vegetales, esto es la capacidad de regenerar una planta completa cuando
están sujetas a estímulos adecuados.
Así las células somáticas de cualquier tejido podrían formar tallos, raíces o
embriones somáticos de acuerdo con la competencia que posean y al
estímulo que reciban.
Esta regeneración ocurre en fases consecutivas:
-

Fase

de

desdiferenciación,donde

las

células

se

vuelven

competentes para responder a cualquier estímulo organogenético
o embriogenético.
-

Fase de inducción, donde las células se determinan para formar un
órgano o un embrión.

-

Fase de realización. Donde se forma el órgano o embrión
propiamente dicho.

Estas fases están directamente afectadas por el balance hormonal del medio
de cultivo. Así en general puede decirse queel proceso de desdiferenciación
generalmente es promovido por una auxina, la de inducción por un balance
hormonal específico del órgano que va a formarse y la de realización por
una disminución de la concentración hormonal en el medio de cultivo.

2. Etapas de la micropropagación
2a. Etapa 0. Preparación del material vegetal.
Los factores que influyen sobre la calidad del explanto son
1. El tipode órgano que sirve como explanto

2. La edad ontogenética y fisiológica del mismo. Los órganos jóvenes
o bien rejuvenecidos son los que tienen mejor respuesta en el
establecimiento que los obtenidos de materiales adultos.
3. La estación en la que se colecta el material. Se recomienda la
recolección durante la estación estival o primaveral, cuando existe
una brotación activa de las yemas, el usode yemas en dormición
ocasiona problemas de contaminación.
4. El tamaño.
5. El estado sanitario general de la planta donante. Es recomendable
hacer crecer las plantas donantes en invernaderos con el fin de
controlar el estado sanitario.
2b. Etapa 1. Establecimiento del cultivo
El objeto de esta etapa es establecer cultivos viables y axénicos. El éxito
depende de:
-

La edad de la planta donante
Laedad fisiológica
El estado del desarrollo
Tamaño del explanto

Los materiales que muestran tener mayor capacidad regenerativa son los
obtenidos de tejidos meristemáticos jóvenes, sean yemas axilares o
adventicias, embriones o semillas en plantas herbáceas y tejido
meristemáticos que como el cambium determinan el crecimiento en grosor
de las plantas leñosas.
Las yemas adventicias (yemas formadas denovo) tienen una mayor tasa de
variación somaclonal en cultivo.
Para asegurar las condiciones de esterilidad del cultivo se pueden hacer a
priori análisis que detecten patógenos (ELISA, PCR).
En el momento de manejar el explante se procede a la desinfección del
mismo (etanol, hipoclorito de Na).
Una vez establecido el cultivo, la aparición de hongos y bacterias puede
hacer necesario lautilización de fungicidas y antibióticos.
2c. Etapa 2. Multiplicación
El objetivo de esta etapa es mantener y aumentar la cantidad de brotes
para los nuevos ciclos de multiplicación sucesivos y poder destinar parte de
ellos a la siguiente etapa de producción (enraizamiento, bulbificación, etc.)
En esta etapa es conveniente evitar la formación de callo para evitar la
variación somaclonal.
En esta etapa losmedios de cultivo, los reguladores del crecimiento como
auxinas, giberelinas y citoquininas y las condiciones de crecimiento juegan
un papel muy importante sobre la multiplicación clonal de los explantos.
Existen dos vías de regeneración, ambas pueden darse directa o
indirectamente a través de la formación de callo:
-

Organogénesis. Mediante la inducción de yemas axilares o
adventicias....