Ficina

Extracción y purificación del complejo enzimático proteolítico (Ficina)

I. RESUMEN
La Ficina es una cistein proteasa como la papaína. Se obtiene del látex de las plantas del genero ficus carica presenta hidrólisis preferencial por los aminoácidos aromáticos. El látex surge de la fractura, incisión o corte de ramas, hojas o frutos sin madurar, contiene enzimas capaces de digerir a la carney un fermento que coagula la leche.
Lo que se quiere es extraer la enzima a partir del higo verde y del higo maduro para investigar si con el fruto verde hay mayor producción de enzima o en el fruto maduro. Se recepcionará la materia prima: fruto maduro y verde para luego proceder seleccionarla tomando en cuenta la apariencia general y contaminación microbiana, se lavará, licuará con agua arazón 3:1, procediendo a la primera extracción tratándose primeramente con buffer fosfato a razón de 1:1 por 6 horas a temperatura ambiente para separar la parte proteica de la no proteica, seguidamente se filtrara con un gasa facilitando así la centrifugación luego de centrifugar por 3minutos a 2000 RPM se desecha el precipitado y el sobrenadante será tratado con etanol a 96 ºG a razón de 3:1 por 30minutos a temperatura ambiente y se volverá a centrifugar por 5 minutos, el sobrenadante será desechado y el precipitado se diluirá con el 75 % de una solución saturada de cloruro de sodio llevando luego a centrifugar por 1.5 minutos a 3000 RPM, el precipitado obtenido se someterá a un proceso de secado a un temperatura adecuada para eliminar la humedad y obtener un solido que luego se molerá paraobtener un producto mas homogéneo.

II. INTRODUCCION
Los enzimas se utilizan para incrementar el valor y disponibilidad de las proteínas, por ejemplo, para aumentar la recuperación de hidrolizados de proteínas a partir de desperdicios de huesos o pescado. Las proteasas difieren ampliamente en su especificidad por el substrato, pudiéndose emplear combinaciones de diferentes enzimas paraincrementar el grado de hidrólisis de una proteína, y también difieren en factores tales como su pH optimo, de forma que se pueden utilizar unas u otras en un amplio rango de condiciones de operación. Aunque se conocen multitud de proteasas microbianas, con frecuencia las derivadas de plantas y animales se utilizan mucho mas a nivel industrial; entre se incluyen la papaína, la ficina y la bromelaínaobtenidos de plantas y la pepsina y cuajo de animales. La acción de las proteasas plantea una serie de problemas debido a la liberación de aminoácidos hidrofóbicos y a las dificultades a la hora de controlar la extensión de la reacción. Entre las aplicaciones de las proteasas se incluyen la hidrólisis de la gelatina en las películas fotográficas para facilitar la recuperación de la plata, Korosi(1976) y en el tratamiento del cuero Monsheimer y Pffeiderer (1981) y también como agentes de limpieza. En la industria alimentaria las propiedades funcionales intrínsecas de las proteínas como la viscosidad y su capacidad para formar espumas y emulsiones pueden optimizarse mediante proteólisis controlada. Por ejemplo se puede utilizar para la modificación enzimática de las proteínas del lacto sueroy de la soja, lo que hace que estas sean funcionalmente mas adecuadas para ser utilizadas en alimentación, en la fabricación de cerveza, hidrólisis de gluten de trigo, producción de extractos de levaduras o de gelatina a partir de colágeno y en la preparación de peptonas, que son proteínas hidrolizadas empleadas como medio de crecimiento en microbiología. Las proteasas también son útiles en larecuperación de proteínas de a sangre, vísceras y huesos provenientes de mataderos, en la decoloración de la hemoglobina haciendo a esta abundante fuente de proteína mas aceptable y en el procesado de los desechos de pescados, caso en el que el enzima parece quedar adsorbido aparentemente en la superficie del substrato (Ward, 1983). También existen datos acerca del empleo de proteasas en la...