Glicemia
C
SIGNIFICACION CLINICA La patología más común relacionada con el metabolismo de los hidratos de carbono es la diabetes mellitus. El diagnóstico precoz y el control de los pacientes diabéticos, tienen por objeto evitar la cetoacidosis y las complicaciones resultantes de la hiperglicemia, mediante el tratamiento adecuado. Dado que existen múltiples factores causales de hiper ohipoglicemia, debe considerarse en cada caso la condición fisiológica y/o la patología presente en el paciente. FUNDAMENTOS DEL METODO El esquema de reacción es el siguiente: glucosa + O2 + H2O GOD > ácido glucónico + H2O2 POD > quinonimina roja
Glicemia
enzimática AA
Para la determinación de glucosa en suero, plasma, orina o líquido cefalorraquídeo INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOSREACTIVOS Durante el uso, el Reactivo A puede colorearse ligeramente no afectando su funcionamiento siempre que se procese un Blanco con cada lote de determinaciones y un Standard periódicamente. Desechar cuando las lecturas del Blanco sean superiores a 0,160 D.O. MUESTRA Suero, plasma, orina o líquido cefalorraquídeo (LCR) a) Recolección: - Suero o plasma: se debe obtener suero de la manera usual oplasma recolectado con anticoagulantes comunes. - Orina: si se trata de una muestra aislada, utilizar preferentemente orina fresca. En caso de no poder realizar el ensayo de forma inmediata, conservar la muestra en refrigerador (2-10oC). Puede realizarse el ensayo en orina de 24 horas. En este caso, recolectar la muestra en un recipiente oscuro conteniendo 5 ml de ácido acético glacial y conservarloen hielo. - LCR: en caso de utilizar LCR, el ensayo debe realizarse en forma inmediata a la obtención de la muestra. b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plasma, se recomienda el uso de Anticoagulante G (EDTA/fluoruro) para su obtención. c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan interferencias por: bilirrubina hasta 10 mg/dl, triglicéridos hasta 500 mg/dl y hemoglobinahasta 350 mg/dl. El ácido ascórbico interfiere en la determinación en orina en cualquier concentración. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las drogas en el presente método. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la destrucción enzimática de la glucosa sanguínea (glucólisis) por hematíes y leucocitos es proporcional a la temperatura a la que se conserva la sangre,siendo máxima a 37oC. Este proceso no se inhibe aún en estado de congelación, por lo que la sangre debe centrifugarse dentro de las 2 horas de la extracción. El sobrenadante límpido se transfiere a otro tubo para su conservación. De esta forma la glucosa es estable 4 horas a temperatura ambiente o 24 horas refrigerada. En caso de no poder procesarse la muestra de la forma indicada, deberáadicionarse un conservador en el momento de la extracción. El LCR puede contaminarse con bacterias y otras células por lo que la determinación debe realizarse de inmediato. En caso de no poder procesarse de esta manera, centrifugar el LCR y conservarlo 3 días a 2-10oC o 5 horas a 20-25oC.
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2 H2O2 + 4-AF + 4-hidroxibenzoato
REACTIVOS PROVISTOS S. Standard*: solución de glucosa 100mg/dl (1 g/l). A. Reactivo A: solución conteniendo glucosa oxidasa (GOD), peroxidasa (POD), 4-aminofenazona (4-AF), buffer fosfatos pH 7,0 y 4-hidroxibenzoato en las siguientes concentraciones: GOD (microbiana) .................................................. t 10 kU/l POD (rábano) .......................................................... t 1 kU/l 4-AF................................................................... 0,5 mmol/l Fosfatos ................................................ 100 mmol/l, pH 7,0 Hidroxibenzoato .................................................... 12 mmol/l REACTIVOS NO PROVISTOS Calibrador A plus de Wiener lab. INSTRUCCIONES PARA SU USO Reactivos Provistos: listos para usar. PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". Utilizar los...
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