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INTRODUCCIÓN
La importancia de las proteínas es, en un primer análisis, cuantitativa: constituyen el 50% del peso seco de la célula (15% del peso total) por lo que representan la categoría de biomoléculas más abundante después del agua.

Las proteínas son compuestos químicos muy complejos formados por una larga cadena de aminoácidos. La mayoría de las proteínas contienen en diferentescantidades de oxígeno, hidrógeno y carbono. En la mayor parte de ellas existe azufre, y en algunas fósforo y hierro.

Así exsisten diferentes métodos para analizar la estructura molecular de la proteína, por ejemplo Sanger que demostró que una molécula de insulina contiene dos cadenas de péptidos unidas entre sí por dos puentes de disulfuro.

En el presente trabajo se realiza la deducción de lasecuencia de aminoácidos de un polipéptido sometido a una hidrólisis ácida, un tratamiento con DNFB, tratamiento con carboxipeptidasas a y b, seguido de un tratamiento con cianuro de bromo y finalmente un tratamiento con las enzimas quimiotrepsina y tripsina.

Se debe estudiar a las proteínas porque su importancia biológica reside, en el elevado número de funciones biológicas que desempeñan, en sugran versatilidad funcional .








RESULTADOS
PROBLEMA:
La hidrólisis parcial de una proteína produjo un número de polipéptidos. Uno de ellos fue purificado. Deduce la secuencia de aminoácidos en este polipéptido, dada la siguiente información:
(a) La hidrólisis ácida completa produjo:
Ala, Arg, 2 Ser, Lys, Phe, Met, Trp, Pro.
(b) El tratamiento con DNFB (Reactivo de Sanger), seguido por unahidrolisis acida completa, produjo Dinitrofenil-alanina (DNP-ala) y ε-Dinitrofenil-lisina (εDNP-lys) como los únicos derivados de la DNP.
(c) Ninguna de las Carboxipeptidasas A o B liberó un aminoácido C-terminal.
(d) El tratamiento con el Bromuro de cianógeno produjo dos péptidos, uno de ellos contiene:
Ser, Trp y Pro.
Y el otro contiene los aminoácidos restantes incluyendo la otra Serina.
(e) Eltratamiento con la Quimiotripsina produce tres péptidos, que contenían:
Ser y Pro.
Met y Trp
Phe, Lys, Ser, Arg y Ala.
(f) El tratamiento con la Tripsina produjo tres péptidos, que contenían:
Ala y Arg.
Lys y Ser.
Phe, Trp, Ser, Pro y Met.
SOLUCIÓN:
Procesos
Resultados
(a) Hidrólisis ácida completa
Alanina (1)
Arginina (1)
Triptófano (1)
Serina (2)
Lisina (1)
Prolina (1)
Fenilalanina (1)
Metionina(1)
(b) Tratamiento con DNFB (Reactivo de Sanger), más hidrólisis ácida completa.
Dinitrofenil-alanina (DNP-ala)
ε-Dinitrofenil-lisina (εDNP-lys)
(c) Reacción con Carboxipeptidasas A y B
Sin resultado
(d) Reacción con Bromuro de cianógeno
Serina, Triptófano y Prolina
Alanina, Arginina, Serina, Lisina, Fenilalanina y Metionina.
(e) Reacción con Quimiotripsina
Serina y ProlinaMetionina y Triptófano
Fenilalanina, Lisina, Serina, Alanina y Arginina
(f) Reacción con Tripsina
Alanina y Arginina
Lisina y Serina
Fenilalanina, Triptófano, Metionina, Serina y Prolina

DESARROLLO:
1) El polipéptido analizado contiene nueve aminoácidos en cadena.
H-___ - ___ - ___ - ___ - ___ - ___ - ___ - ___ - ___-OH
2) El resultado del proceso (b) con la producción de Dinitrofenil-alanina(DNP-ala) nos indica que el aminoácido N-terminal es la Alanina.
H-Ala-___ - ___ - ___ - ___ - ___ - ___ - ___ - ___-OH
Y la producción de ε-Dinitrofenil-lisina (εDNP-lys) nos indica también un carbono N- terminal, pero como no es el carbono α, entonces no está dentro de la cadena principal, por lo tanto la Lisina no es el aminoácido N-terminal.
3) A partir del proceso (c), se deduce que elaminoácido C-terminal es la Prolina, ya que este es el único aminoácido que no reacciona con Carboxipeptidasa A, ni B.
H-Ala - ___ - ___ - ___ - ___ - ___ - ___ - ___ - Pro-OH
4) Del proceso (d) con Bromuro de cianógeno que corta en Met, y como ya se demostró que la (Pro) es el aminoácido C-terminal y que (Ala) es el aminoácido N-terminal, tenemos los siguientes fragmentos:
H- ___ - ___ -Pro-OH...