laboratorio extracción de ADN


LABORATORIO Nº 7.
AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE ADN





JOHN WILMER MARINEZ CRUZ
JOSE DARIO OÑATE FUENTES
TATIANA SARMIENTO CARCAMO
RAFAEL EMILIO ZAMBRANO DAZA
LUIS GERARDO ZULETA PEREZ





INGENIERIA AMBIENTALY SANITARIA
Asignatura: BIOLOGIA I
Docente: JOSE MILTON OLIVELLA




UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR
VALLEDUPAR
2013


INTRODUCCION




El ADN o Elácido desoxirribonucleico, es un ácido nucleico que contiene instrucciones genéticas usadas en el desarrollo y funcionamiento de todos los organismos vivos conocidos, es responsable de su transmisión hereditaria. El papel principal de la molécula de ADN es el almacenamiento a largo plazo de información. Muchas veces, el ADN es comparado con un plano o una receta, o un código, ya que contiene lasinstrucciones necesarias para construir otros componentes de las células, como las proteínas y las moléculas de ARN. Los segmentos de ADN que llevan esta información genética son llamados genes, pero las otras secuencias de ADN tienen propósitos estructurales o toman parte en la regulación del uso de esta información genética.




OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL
Aislar e identificar DNA demuestras de cebolla.

OBJETIVOS ESPECIFICOS
Comprender la importancia de cada uno de los reactivos empleados para la obtención de DNA.

Diferenciar el DNA de otros componentes celulares mediante una reacción de coloración.




ESTRUCTURA DEL ADN
En la década de los cincuenta, el campo de la biología fue convulsionado por el desarrollo del modelo de la estructura del ADN. James Watson yFrancis Crick en 1953 demostraron que consiste en una doble hélice formada por dos cadenas.
El ADN es un ácido nucleico formado por nucleótidos. Cada nucleótido consta de tres elementos:
a. un azúcar: desoxirribosa en este caso (en el caso de ARN o ácido ribonucleico, el azúcar que lo forma es una ribosa),
b. un grupo fosfato y
c. una base nitrogenada
Si la molécula tiene sólo el azúcarunido a la base nitrogenada entonces se denomina nucleósido.
Las bases nitrogenadas que constituyen parte del ADN son: adenina (A), guanina (G), citosina (C) y timina (T). Estas forman puentes de hidrógeno entre ellas, respetando una estricta complementariedad: A sólo se aparea con T (y viceversa) mediante dos puentes de hidrógeno, y G sólo con C (y viceversa) mediante 3 puentes de hidrógeno.
Losextremos de cada una de las hebras del ADN son denominados 5’-P (fosfato) y 3’–OH (hidroxilo) en la desoxirribosa. Las dos cadenas se alinean en forma paralela, pero en direcciones inversas (una en sentido 5’ → 3’ y la complementaria en el sentido inverso), pues la interacción entre las dos cadenas está determinada por los puentes de hidrógeno entre sus bases nitrogenadas. Se dice, entonces, quelas cadenas son antiparalelas.
Figura 2. Estructura del ADN. El ácido desoxirribonucleico es un polímero de dos cadenas antiparalelas (orientación 5’ 3’ y 3’ 5’). Cada cadena está compuesta por unidades de un azúcar (desoxirribosa), un fosfato y una base nitrogenada unidas entre sí por enlaces fosfodiéster.

MATERIALES Y REACTIVOS:
Solución de Sal/Detergente: agregue a 10 mL de detergente y 10gramos de NaCl (sin YODO) a 90 mL de agua destilada.
Ablandador de Carne: Agregue 5 gramos del ablandador a 95 mL de agua destilada.
Solución al 5% p/v de NaCl.
Etanol de 95% o isopropanol de 95% helado.
Cebolla blanca fresca.
Cuchillo.
Agua destilada.
Vaso de precipitado de 100 mL.
Tubos de ensayo.
Varillas agitadoras de vidrio.
Papel filtro.
Hielo.
Nevera de icoporTabla para picar.

PROCEDIMIENTO
METODO A
tomamos una cebolla y la picamos en cuadritos de un centímetro cuadrado
agregamos 2 gramos de cebolla picada en un vaso de precipitado
adicionamos una cantidad suficiente de solución de sal y detergente que cubra la cebolla y la dejamos durante 5 minutos

luego decantamos el líquido y se agrega en un tubo de ensayo limpio y se le agrega 5 ml de...