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Aislamiento de cepas de Rhizobium spp., asociados a dos leguminosas forrajeras.

Artículo
Original

Aislamiento de cepas de Rhizobium spp., asociados a dos
leguminosas forrajeras en el Centro Biotecnológico del Caribe
Isolation of Rhizobium spp., associated two forage leguminous in the
Caribbean Biotechnological Center
Jorge L. Hernández1, Juan G. Cubillos-Hinojosa2*, Pablo E. Milian3RESUMEN
El propósito de esta investigación fue aislar cepas nativas de Rhizobium spp., a partir de
nódulos de las plantas leguminosas forrajeras, Leucaena (Leucaena leucocephala) y
Matarratón (Gliricidia sepium) en cultivos establecidos en el Centro Biotecnológico del Caribe,
ubicado en el valle del Cesar, Colombia. Los nódulos obtenidos se llevaron al laboratorio y se
sembraron en LevaduraManitol Agar (YMA). Se realizaron pruebas de identificación
fisiológica en YMA + Azul de Bromotimol (AB), YMA + Rojo Congo, Peptona Glucosa Agar
(PGA) + Purpura de Bromocresol, prueba de cetolactasa en Levadura Lactosa Agar (LLA),
tinción de Gram, y pruebas de crecimiento en agar XLD y Hektoen. Se aislaron 22 cepas
nativas de Rhizobium spp., 11 a partir de L. leucocephala y 11 a partir G.sepium. Las cepas
seleccionadas se sometieron a pruebas de tolerancia como pH, temperatura, concentración de
NaCl y antibióticos. Se observaron bacilos cortos móviles gram negativos, con reacción acida
en el medio YMA + AB. Algunas cepas, no toleraron las sales biliares presentes en agar XLD y
en agar Hektoen. Las pruebas de tolerancia a factores abióticos demostraron mejor
crecimiento en pHentre 9.0 y 11, entre 30 y 37°C, y crecimiento moderado en
concentraciones de NaCl 1% y 2%, todas las cepas presentaron resistencia al cloranfenicol.
Estos resultados afianzan la posibilidad de establecer estudios que permitan evaluar en una
etapa de invernadero y campo el potencial de fijación de nitrógeno y promoción de
crecimiento en plantas leguminosas utilizadas como forraje para ganadobovino.
Palabras clave: cepas nativas, Leucaena leucocephala, Gliricidia sepium, nódulos, Rhizobium
spp.
ABSTRACT
The purpose of this research was to isolate native strains of Rhizobium spp. from nodules of
leguminous forage leucaena (Leucaena leucocephala) and matarratón (Gliricidia sepium) in
1. Microbiólogo Agroindustrial. Universidad Popular del César, Balneario Hurtado vía a Patillal.Valledupar, Colombia.
2. Microbiólogo Agroindustrial. Instructor SENA Distrito Capital. Carrera 30 No. 14- 53, Complejo Paloquemao, Bogotá. Colombia.

3. Microbiólogo Agroindustrial. Proambiente S.A.S. Carrera 60 No. 70 – 31. Barranquilla, Colombia.

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Revista Colombiana de Microbiología Tropical. Vol. 2 N° 2. Enero – Junio 2012.

crops grown in the Caribbean Biotechnology Center, located inthe valley of Cesar, Colombia.
The nodules obtained were taken to the lab and grown in Yeast Mannitol Agar (YMA).
Identification tests were conducted physiological YMA + bromthymol blue (AB), YMA + Congo
Red, Glucose Peptone Agar (GPA) + bromocresol purple, evidence in Yeast Lactose Agar
cetolactasa (ALL), Gram staining and tests XLD agar growth and Hektoen. We isolated 22
native strains ofRhizobium spp., 11 from L. leucocephala and 11 from G. sepium. The selected
strains were tested for tolerance as pH, temperature, concentration of NaCl and antibiotics.
There were gram-negative bacilli mobile short, with acid reaction in YMA + AB. Some strains,
did not tolerate the bile salts present in XLD agar and Hektoen agar. Evidence of tolerance to
abiotic factors showed better growth atpH between 9.0 and 11 at temperatures between 30
and 37 ° C, and moderate growth in NaCl concentrations of 1% and 2%, all strains were
resistant to chloramphenicol. These results entrench the possibility of studies to evaluate in a
greenhouse and field phase of the potential for nitrogen fixation and growth promotion of
leguminous plants used as fodder for cattle.
Keywords: native strains,...