metodos para medir enzima ck en laboratorio

métodos y características experimentales para medir en el laboratorio enzimas en cuadros de infarto al miocardio (CK y CK-MB) 




- Aspartato aminotransferasa (AST, AAT, SGOT, L-aspartato: 2-oxoglutarato
aminotransferasa, EC 2.6.1.1).
Cada molécula de AST consta de dos unidades de la misma cadena polipeptídica. Los
pesos moleculares de estos dímeros son 93.000 daltons para la enzimasoluble y 90.400 daltons
para la enzima mitocondrial (22).

Cataliza la transferencia reversible de un grupo α-amino de un aminoácido específico
(L-glutamato o L-aspartato) a un cetoácido específico (2-oxoglutarato u oxaloacetato). Es
bastante inespecífica para el par oxoglutarato/glutamato, mostrando una relativa inespecificidad
para el segundo sustrato que preferentemente esaspartato/oxaloacetato pero puede ser también
cualquier otro par aminoácido/oxoácido. Aunque a pH fisiológico la reacción es
energéticamente favorable hacia la formación de aspartato y α-cetoglutarato, in vivo, la reacción
transcurre en sentido contrario proveyendo al organismo de una fuente de nitrógeno para el ciclo
de la urea. (Figura 2)
El hígado, corazón, músculo esquelético y riñóntienen actividades similares de AST;
por ello, la liberación de la enzima no es órgano-específica.

Durante mucho tiempo su determinación ha resultado útil en el diagnóstico del SCA,
por su alta presencia en músculo cardíaco y por su corta vida media, aproximadamente 20 horas,
pero debido a su gran inespecificidad cada vez se usa menos (23-25).

- Lactato deshidrogenasa (LD, LDH,(S)-lactato-NAD+
óxidoreductasa, EC 1.1.1.27).
La enzima LD posee un peso molecular de aproximadamente 140.000 daltons y es un
tetrámero compuesto por subunidades de peso molecular 35.000 daltons cada una. Las
subunidades consisten en dos formas, H (“Heart”, corazón) y M (“Muscle”, músculo), las cuales
se encuentran polimerizadas para formar las cinco isoenzimas de LD. (26)

Cataliza unareacción redox reversible, en la que el piruvato es reducido a lactato
gracias a la oxidación de NADH a NAD+
. El equilibrio de la reacción es dependiente del pH;
con pH alcalino se favorece la conversión de lactato a piruvato y el pH neutro favorece la
reacción inversa (figura 3) (27).

La isoenzima principal del corazón (HHHH), ejerce una actividad máxima en presencia
deconcentraciones reducidas de piruvato y es inhibida por un exceso de éste. Por el contrario, la
principal isoenzima del músculo (MMMM) exhibe una actividad máxima con altas
concentraciones de piruvato y, un exceso de éste, produce menor grado de inhibición. Esto se
debe a que el corazón metaboliza ácidos grasos e hidratos de carbono a una velocidad constante
con una oxidación completa del piruvato através del ciclo de Krebs. Por el contrario, el
músculo, debe operar a las bruscas demandas energéticas durante el ejercicio con grandes
incrementos de los niveles tisulares de piruvato y lactato causados por el metabolismo
anaerobio.


La enzima LD se encuentra en el citosol de todas las células humanas y, por lo tanto,
tendría muy poco valor de especificidad diagnóstica si no fuesepor la presencia de isoenzimas,
que poseen actividades diferentes en los distintos tejidos. El corazón y los eritrocitos contienen
principalmente LD1 y LD2, mientras que el músculo esquelético y el hígado contienen LD3 y, en
menor grado, LD4 y LD5. El suero normal contiene principalmente LD2, con una menor cantidad
de LD1 y de las otras isoenzimas. Si las enzimas provienen del tejidocardíaco es posible, a
menudo, observar una modificación sérica del cociente LD1/LD2 (28).

Por otro lado, la vida media de LD depende de la isoenzima considerada; la isoenzima 1
(HHHH) exhibe una vida media de aproximadamente 100 horas, pero la isoenzima 5 (MMMM)
posee una vida una vida media de sólo 10 horas. La importancia de este fenómeno es evidente
en la discusión del mecanismo de...