Micro3

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Bol Med Hosp Infant Mex 2013;70(2):138-150

A

Características patogénicas de cepas de Pseudomonas aeruginosa
resistentes a carbapenémicos, asociadas con la formación
de biopelículas
Pathogenic characteristics of Pseudomonas aeruginosa strains resistant to carbapenems
associated with biofilm formation
Sara A. Ochoa,1 Fernanda López-Montiel,1* Gerardo Escalona,1 AriadnnaCruz-Córdova,1
Leticia B. Dávila,1 Briseida López-Martínez, Yolanda Jiménez-Tapia,2 Silvia Giono,3 Carlos Eslava,4
Rigoberto Hernández-Castro,5 Juan Xicohtencatl-Cortes1
RESUMEN

ABSTRACT

Introducción. A escala mundial, se ha observado la aparición de
cepas de Pseudomonas aeruginosa multirresistentes durante las
últimas décadas. Este patógeno oportunista produce mecanismos de resistencia adiversos antibióticos. La resistencia a carbapenémicos en cepas de P. aeruginosa se ha asociado con la formación de biopelículas bacterianas, favorecidas por la presencia
de exopolisacáridos (EPS) embebidos en una matriz extracelular
y por la producción de los pili tipo IV (T4P). El objetivo de este
trabajo fue evaluar la formación de biopelículas en cepas clínicas
aisladas en el Hospital Infantil deMéxico Federico Gómez de P.
aeruginosa resistentes a carbapenémicos, a través de la cuantificación de los expolisacáridos totales-reductores y su asociación
con la expresión fenotípica de los T4P.
Métodos. Se realizaron ensayos de susceptibilidad antibiótica por
el método de Kirby-Bauer en 92 cepas clínicas de P. aeruginosa.
Asimismo, se determinó la concentración mínima inhibitoria (MIC)
paraimipenem (IMP) y meropenem (MEM) por el método de dilución seriada en placas con agar con un replicador de Steers.
La producción de metalo-β-lactamasas fue determinada mediante
la técnica de difusión en disco y de sinergismo. Las biopelículas
fueron realizadas en cepas clínicas de P. aeruginosa resistentes
a carbapenémicos, a través de la cuantificación de cristal violeta,
azúcares totales (antrona) yazúcares reductores (DNS), además
de la expresión fenotípica de los T4P por la actividad de twitching
motility. La diversidad genética de las cepas formadoras de bio-

Background. In recent years, the worldwide emergence of multidrug-resistant strains of Pseudomonas aeruginosa has been
observed. This opportunistic pathogen produces mechanisms of
resistance to several antibiotics. The resistanceto carbapenems
in P. aeruginosa strains has been associated with bacterial biofilm
formation, favored by the presence of exopolysaccharides (EPS)
embedded in an extracellular matrix and to the production of type
IV pili (T4P). We undertook this study to assess biofilm formation
in clinical strains of P. aeruginosa resistant to carbapenems isolated at the Hospital Infantil de Mexico Federico Gomez(HIMFG)
through quantification of total-reducing EPS and its association
with the phenotypic expression of T4P.
Methods. Antibiotic susceptibility tests were performed using
the Kirby-Bauer method in 92 clinical isolates of P. aeruginosa;
likewise, the minimum inhibitory concentration (MIC) was determined for imipenem (IMP) and meropenem (MEM) by the serial
dilution method in agar plates with aSteers replicator. Production
of metallo-β-lactamase (MBL) was determined by the disk diffusion method and synergism. Biofilm formation was performed
in clinical isolates of P. aeruginosa resistant to carbapenems
through the quantification of crystal violet, total sugar (anthrone),
and reducing sugar (DNS), in addition to the phenotypic expression of T4P activity of twitching motility. Thegenetic diversity of
strains forming biofilm and producing reducing sugars was evaluated by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE).

1
2
3
4
5

*

Laboratorio de Bacteriología Intestinal, Hospital Infantil de México Federico Gómez
Laboratorio Clínico Central, Hospital Infantil de México Federico Gómez
Laboratorio de Bacteriología Médica, Departamento de Microbiología, Instituto Politécnico Nacional...