Microscopia electronica de transmision
La microscopia electrónica de transmisión (MET) aplicada a las ciencias de la vida permite estudiar a nivel celular y subcelular, citoquímico eimmunocitoquímico muestras biológicas, tejidos animales y vegetales, cultivos celulares y bacterianos, virus, estructuras subcelulares, y macromoléculas.
El microscopio electrónico de transmisión es un instrumentoque utiliza como fuente de iluminación un haz de electrones que son generados por un filamento de tungsteno cuando este por efecto termoiónico se pone incandescente. Estos electrones son acelerados ydirigidos hacia la muestra mediante lentes electromagnéticas en condiciones de alto vacío.
Con el fin de observar la muestra en el microscopio electrónico de transmisión hay que prepararlapreviamente según métodos específicos de fijación, inclusión ultramicrotomía, o crioultramicrotomía. La imagen que se obtiene es plana y monocromática (en blanco y negro) y se puede llegar a un límite deresolución de 0.3 nm
Prestaciones:
Procesado convencional de muestras para microscopia electrónica de transmisión que comprende: Fijación química, deshidratación, e, inclusión en resinas (Epon, Spurr, LRWhite etc.….) así como la obtención de secciones finas y ultrafinas debidamente contrastadas para observar al microscopio.
Procesado de muestras con fijación por congelación para hacer estudiosde inmunocitoquímica las técnicas utilizadas son:
a)Crioultramicrotomía. Consiste en la realización de cortes ultrafinos por congelación)
b)Criosubstitución y PLT Esta técnica consiste en realizar lasubstitución del agua del material fijado por congelación por otros agentes de inclusión y todo este proceso se hace a baja temperatura
La PLT consiste en realizar procesos de inclusión, demateriales fijados químicamente; pero se realiza una reducción progresiva de la temperatura en los pasos de deshidratación , inclusión y polimerización en diferentes resinas
Fijación a Alta presión...
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