Practica 1
Páginas: 4 (784 palabras)
Publicado: 16 de marzo de 2015
Fundamentos de la práctica
La ley de Beer-Lamber nos permite relacionar la absorbancia (grado de absorción de la luz) y la concentración del soluto, permitiéndonos así, en nuestrapráctica, hallar experimentalmente el coeficiente de extinción molar de la hemoglobina (E) a una determinada temperatura y longitud de onda, mediante esta ecuación lineal:
Para ello hemos estudiadolas intensidades de color de la sustancia comparando la intensidad inicial de la luz con la intensidad con la intensidad del haz tras haber atravesado la disolución, calculando el valor de laabsorbancia de la siguiente forma:
Procedimiento y resultados experimentales
Para la realización de la práctica hemos necesitado 7 tubos de ensayo rotulado uno de ellos como “blanco” (1ml H2O, 3ml tampón)y los demás del uno al seis (3ml tampón, H2O en concentraciones decrecientes y Hb en concentraciones crecientes).
Antes de meterlos al espectrofotómetro hemos de agitarlos con el vortex.
Utilizamosel tubo “blanco “ para calibrar el espectofotómetro para así obviar la absorbancia del tampón y el H2O . A continuación medimos la absorbancia de cada tubo a 550 nm (longitud de onda escogida que nosproporciona una cantidad igual entre desoxihemoglobina y oxihemoglobina ).
Tubo
A550
1
0,71
2
0,138
3
0,266
4
0,385
5
0,518
6
0,657
Cálculos e interpretación de los resultados
Tras hallar lasdistintas concentraciones de Hb mediante la relación:
Las pusimos en contraposición a las absorbancias anteriormente obtenidas en unos ejescartesianos, obteniendo la siguiente gráfica, que se corresponde aproximadamente con la línea recta cuya ecuación (ley de Beer-Lambert) nos predecía.
Pese haber obtenido aparentemente una línea rectalos datos obtenidos no dan una recta totalmente perfecta y esto se debe a que hay cierto margen de error .
Posteriormente con la recta obtenida calculamos la pendiente de dicha gráfica ya que la...
Fundamentos de la práctica
La ley de Beer-Lamber nos permite relacionar la absorbancia (grado de absorción de la luz) y la concentración del soluto, permitiéndonos así, en nuestrapráctica, hallar experimentalmente el coeficiente de extinción molar de la hemoglobina (E) a una determinada temperatura y longitud de onda, mediante esta ecuación lineal:
Para ello hemos estudiadolas intensidades de color de la sustancia comparando la intensidad inicial de la luz con la intensidad con la intensidad del haz tras haber atravesado la disolución, calculando el valor de laabsorbancia de la siguiente forma:
Procedimiento y resultados experimentales
Para la realización de la práctica hemos necesitado 7 tubos de ensayo rotulado uno de ellos como “blanco” (1ml H2O, 3ml tampón)y los demás del uno al seis (3ml tampón, H2O en concentraciones decrecientes y Hb en concentraciones crecientes).
Antes de meterlos al espectrofotómetro hemos de agitarlos con el vortex.
Utilizamosel tubo “blanco “ para calibrar el espectofotómetro para así obviar la absorbancia del tampón y el H2O . A continuación medimos la absorbancia de cada tubo a 550 nm (longitud de onda escogida que nosproporciona una cantidad igual entre desoxihemoglobina y oxihemoglobina ).
Tubo
A550
1
0,71
2
0,138
3
0,266
4
0,385
5
0,518
6
0,657
Cálculos e interpretación de los resultados
Tras hallar lasdistintas concentraciones de Hb mediante la relación:
Las pusimos en contraposición a las absorbancias anteriormente obtenidas en unos ejescartesianos, obteniendo la siguiente gráfica, que se corresponde aproximadamente con la línea recta cuya ecuación (ley de Beer-Lambert) nos predecía.
Pese haber obtenido aparentemente una línea rectalos datos obtenidos no dan una recta totalmente perfecta y esto se debe a que hay cierto margen de error .
Posteriormente con la recta obtenida calculamos la pendiente de dicha gráfica ya que la...
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