Practicas de laboratorio

PRACTICA No. 6
FROTIS SANGUINEO

INTRODUCCION:
Una extensión o frotis sanguíneo consiste en recubrir parcialmente un porta con una gota de sangre, de tal manera que las células de ésta se dispongan formando una sola capa de ellas. Esto puede hacerse manual o automáticamente. Lo último se realiza mediante un aparato (spinner) que centrifuga rápidamente el porta con la sangre depositada en sucentro. Con este aparato se obtienen unos frotis que presentan una distribución celular muy homogénea.
PARTES DE UNA EXTENSIÓN.
CABEZA.
Es la zona inicial de la extensión.
Es la región más gruesa.
En ella se encuentra una mayor proporción de linfocitos, y los hematíes forman aglomerados (pilas de monedas).
CUERPO.
Es la zona media del frotis.
Su espesor es el apropiado.
En ellaexiste una adecuada proporción entre los distintos tipos de leucocitos.
Contiene la "zona ideal" de observación, que corresponde a la porción que limita con la cola.
COLA.
Es la zona final de la extensión.
Suele tener un aspecto redondeado.
Es la región más fina.
En ella se encuentra una mayor proporción de leucocitos grandes (granulocitos y monocitos), y además. los hematíes estándeformados y presentan una tonalidad uniforme.
En su porción terminal suelen ser más abundantes las plaquetas, sobre todo si son grandes.
BORDES.
Contienen una mayor proporción de leucocitos grandes.
Si están deshilachados, en ellos las células son difíciles de reconocer por estar deformadas o destruidas

CARACTERÍSTICAS DE UNA BUENA EXTENSIÓN.
La cabeza ha de estar cerca de uno de losextremos del porta.
La cola debe estar cercana al otro extremo del porta, pero sin llegar a él.
El borde de la cola tiene que estar finamente deshilachado. Ese fino deshilachamiento recibe el nombre de "barbas".
Toda la extensión ha de ser fina y homogénea.
Los bordes laterales de la extensión deben estar separados de los bordes del porta por 1 mm aproximadamente.
Una extensión normal ha detener una longitud de las ¾ partes del portaobjetos.
El uso de teñidores automáticos exige la realización de extensiones más cortas que las consideradas normalmente como correctas (con una longitud de la mitad del portaobjetos).





UTILIDAD DE LAS EXTENSIONES.
El estudio de las extensiones sanguíneas es esencial para el análisis morfológico de las células hemáticas y para larealización del recuento diferencial linfocitario (RDL). Además, es imprescindible para la distinción de una auténtica trombopenia de una pseudotrombopenia producida por agregados plaquetarios.
La investigación de las extensiones también es útil para la comprobación de las alarmas que proporcionan los autoanalizadores hematológicos
REALIZACIÓN DE UNA EXTENSIÓN SANGUÍNEA.
Las extensiones sanguíneasse llevan a cabo deslizando un porta sobre otro en el que se ha depositado previamente una gota de sangre. Con esto se obtiene una fina capa de células sanguíneas que puede ser adecuadamente observada con el microscopio.
Material necesario:
Una lanceta de aplicación manual o automática (por ejemplo, la del sistema Glucolet® de los laboratorios Ames).
Algodón.
Un capilar no heparinizado, sila muestra es sangre venosa anticoagulada, o heparinizado, si la muestra es sangre capilar.
2 portas limpios y libres de grasa. Uno de ellos puede ser normal y el otro ha de ser, preferentemente. esmirilado y biselado (el porta extensor). Para mantener limpios los portas, se deben seguir las siguientes indicaciones:
Lavar los portas con agua y jabón líquido. Aclararlos con abundante aguacaliente. Sumergir los portas, durante una hora en una solución de etanol- éter etílico o, simplemente etanol. Volver a aclarar los portas y dejar secar. Por último recordar que siempre debemos tocar los portas por los bordes, de esta forma evitamos manchar las superficies de los mismos con suciedad o grasa procedente de los dedos.
Guantes desechables.
Un rotulador de vidrio.
Reactivos:
Un...