practico

EXTRACCIÓN DE ADN EN CÉULUAS VEGETALES Y ANIMALES
OBJETIVO
En esta práctica realizaremos la extracción del ADN de células vegetales y animales, poniendo de manifiesto su estructura fibrilar y el extraordinario grado de arrollamiento, que permite el empaquetamiento en el núcleo celular de las larguísimas cadenas de esta molécula.

INTRODUCCIÓN
Los ácidos nucleicos son moléculas orgánicas degran importancia en la transmisión de los caracteres hereditarios y en la síntesis de proteínas. Los avances científicos en este campo tienen aplicaciones médicas, agrícolas, ganaderas e industriales. Gran parte de las investigaciones en biología molecular actual se realizan sobre estas moléculas orgánicas
A nivel químico los ácidos nucleicos son polímeros lineales de nucleótidos, quienes a suvez se componen de un azúcar de cinco carbonos, bases nitrogenadas y un grupo fosfato.
Existen dos tipos de ácidos nucleicos:
ADN, polímero de desoxirribonucleótidos
ARN, polímero de ribonucleótidos
Los desoxirribonucleótidos monofosfato de adenina, guanina, citosina y timina forman parte del ADN. Los ribonucleótidos monofosfato de adenina, guanina, citosina y uracilo forman parte de los ARN.El ADN contiene la información genética que determina el desarrollo del indi­viduo y sus características; esto es así en todas las especies, salvo en algunos virus que contienen la información genética en el ARN.
La estructura del modelo actual de ADN fue descrita por primera vez por los investigadores F. Crick y J. Watson, en 1953, quienes postularon que dos moléculas de ADN, conformadas,cada una, por una cadena de polinucleotidos, se enrollaban bajo un mismo eje formando una hélice con capacidad de rotación.
En las células eucariotas, el ADN se encuentra en el núcleo, y una pequeña cantidad en las mitocondrias y los cloroplastos. En las células pro­cariotas, la molécula de ADN es circular, y además, estas células pueden tener otras moléculas más pequeñas de ADN llamadas plásmidos.El ARN es un polirribonucleótido formado fundamentalmente por los ribonucleótidos de adenina, guanina, citosina y uracilo (en vez de la timina del ADN). La pentosa es la ribosa, que tiene un grupo hidroxilo en el carbono 2'.
La interacción de los ácidos nucleicos en la expresión de la información genética queda expresada en lo que se conoce como dogma central de la biología molecular.FUNDAMENTO
El ADN se encuentra en el interior del núcleo celular, disperso y muy replegado, unido a proteínas para formar la cromatina. Para poder extraerlo es necesario romper las células y separar el núcleo para después romper éste y liberar el ADN. Una vez liberado se debe separar de las proteínas y precipitarlo para su extracción

MATERIALES Y MÉTODOS
Materiales:
Para la extracción deADN:

2 a 3 frutillas congeladas desde al menos una noche antes.
20 mL de alcohol etílico (etanol) 90° frío (se recomienda refrigerar desde una noche previa del experimento).
1 bolsa pequeña de plástico con cierre (tipo Ziplock)
9 tubos de ensayo
1 gradilla
1 probeta de 50 mL
1 vaso de precipitado 100 ml
1 embudo pequeño
1 pipeta de 5 mL
1 ó 2 círculos de papel filtro
2 palilloslargos o varillas de vidrio
Solución para extracción (30 mL)
Cubos de hielo para enfriar los extractos y el alcohol
Marcador permanente o masking tape para etiquetar los tubos de ensayo
1 cronómetro

Para observar las propiedades fisicoquímicas de los ácidos nucleicos
3 tubos con las hebras de ADN obtenidas en la extracción
10 mL de clara de huevo (2 huevos enteros por grupo)
10 ml de aguadestilada
10 ml de HCl 0.1 N
10 ml de reactivo biuret
3 tubos de ensayo
4 pipetas
Mechero y trípode
1 gradilla para tubos de ensayo
Vaso de precipitado de 500 mL
Termómetro
Pinza para tubo de ensayo
1 cronómetro

Procedimiento:
I.- Extracción de ADN
1.- Tiempo antes de comenzar la práctica congelar las frutillas y enfriar el alcohol (es mejor meterlo al refrigerador una noche antes...