Purificación, cuantificación y análisis electroforético de ADN








CENTRO DE CIENCIAS BASICAS
DEPARTAMENTO DE QUIMICA
ACADEMIA DE BIOLOGIA CELULAR



REPORTE 3
“Purificación, cuantificación y análisis electroforético de ADN”


IngenieríaBioquímica
5to semestre
14 de Octubre del 2011


Profesor: M.C. Rosalba Beas Fernández
Ana Victoria Valdivia Padilla


RESULTADOS
En esta práctica se purifico, cuantifico y analizo por unaelectroforesis, el ADN obtenido de la práctica anterior.
1. La pastilla que se obtuvo en esta práctica tiene un color más blanco que la obtenida en la práctica anterior, y su tamaño es un poco menor.Figura 1. Pastillas obtenidas en la practica 2, tanto de la muestra animal como vegetal
Figura 2. Pastillas obtenidas después de su purificación, en muestras animal y vegetal

2.Mediciones obtenidas en el espectrofotómetro
Longitud de Onda
Absorbancia Tejido Animal
Absorbancia Tejido Vegetal
260 nm
0.101
0.263
280 nm
0.057
0.162
310 nm
0.015
0.008

Cálculos paraTejido Animal


Esta muestra tiene 505 µg/ml de ADN
Como se tenía un volumen total de 50 µl:

505 µg --------------- 1000 µl X= 25.5 µg
X --------------- 50 µl
Nuestra muestratenía un total de 25.5 µg de ADN
Para calcular la contaminación de ARN, proteínas o compuestos fenólicos:

Esto nos dice que nuestro ADN tiene una pureza aceptable.
Por último se estima la pureza delADN con respecto a los carbohidratos:
0.101 ---------- 100% X= 14. 85
0.015 ---------- X

Lo que nos dice que nuestra muestra contiene un 14.85% en carbohidratos.

Cálculos paraTejido Vegetal


Esta muestra tiene 1315 µg/ml de ADN

Como se tenía un volumen total de 50 µl:

1315 µg --------------- 1000 µl X= 65.75 µg
X --------------- 50 µlNuestra muestra tenía un total de 65.75 µg de ADN
Para calcular la contaminación de ARN, proteínas o compuestos fenólicos:

Esto nos dice que nuestro ADN tiene contaminación por proteínas o por...