siembra y cultivo de microorganismos

SIEMBRA Y CULTIVO DE MICROORGANISMOS
OBJETIVO GENERAL:

            Adiestrar al participante con el manejo y utilidad de los diferentes métodos de siembra y cultivos de microorganismos.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

  Realizar experimentalmente las distintas técnicas de siembra para el aislamiento microbiano.

  Estudiar características culturales de crecimiento de los microorganismos enmedio sólido.

  Investigar las manifestaciones de crecimiento de los microorganismos en medio líquido.

  Comparar la unidad practica de cada uno de los métodos de siembra con respecto al crecimiento observado tanto en medio sólido como en medio liquido.

  Comprobar el desarrollo microbiano en las siembras por diluciones seriadas y por diluciones y siembra (asas), a medida que aumentalas diluciones.
  
INTRODUCCIÓN

Para estudiar las características de los microorganismos (forma, estructura, tamaño, consistencia, cromogenesis y otros), es necesario sembrarlos y cultivarlos en medios de cultivos apropiados según el tipo de microorganismo, de tal forma que proporcione los nutrientes necesarios para su crecimiento y desarrollo. La siembra de microorganismos se realiza enmedios sólidos y líquidos.

La mayoría de las bacterias son de rápida multiplicación y agotan los nutrientes de los medios de cultivos en forma acelerada. Las mismas una vez sembrada en los medios de cultivos deben incubarse a una temperatura óptima de crecimiento y al abrigo de la luz.

La siembra y cultivo de microorganismos son importantes en el estudio de los mismos ya que permite MATERIALES Y EQUIPO UTILIZADO:

  Mechero
  Incubadora
  Baño de agua
  Asa de platino estéril
  Tubos de ensayo con medios de cultivo sólido y líquidos esterilizados
  Espátula de Drigalski
  Gradillas para tubo de ensayo
  Placa da petri estériles, de vidrio (100 x 15mm)
  Pipetas bacteorologicas de 0.1, 0.2ml, etc. y pipetas pasteur estériles
  Frascos de dilución con 90ml de aguapeptonada o solución fisiológica
  Cepas de microorganismos en medio liquido y sólido

MEDIOS DE CULTIVOS Y SOLUCIONES

  Agar nutritivo
  Caldo nutritivo
  Agua peptonada al 0.1% o solución fisiológica estéril

 TABLA I
COMPOSICIÓN DEL AGAR NUTRITIVO

COMPONENTE
CANTIDAD
Extracto de carne
3 g
Peptona
5 g
Agua destilada
1 L


TABLA II
COMPOSICIÓN DEL CALDO NUTRITIVOCOMPONENTE
CANTIDAD
Extracto de carne
3 g
Peptona
5 g
Agua destilada
1 L
Agar
15 g



TIPO DE SIEMBRA

DILUCIÓN

FORMA

SUPERFICIE

ELEVACIÓN

BORDE

ESTRUCTURA INTERNA





SUPERFICIE
10-1
Circular
Festoneada
Lisa
Difuso
Entero
Transparente

10-2
Circular
Festoneada
Lisa
Ligeramente convexa
Entero

Transparente

10-3
Circular
Festoneada

LisaLigeramente convexa
Entero
Opaco Transparente


PROFUNDIDAD
10-1
Circular
Festoneada
Anillos concéntricos, lisa
Difuso
Entero
Opaco

10-2
Circular, rizoide
Liso-rugoso
Difuso
Entero
Transparente - Opaco

10-3
Circular
Liso-anillos concéntricos
Difuso
Entero
Opaco

CUADRO I  SIEMBRA EN PLACA POR DILUCIÓN SERIADA

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

La siembra en placa a partir ddilución permite cultivar los microorganismos ya que posee los nutrientes necesarios para su desarrollo.

“El  cultivo de microorganismos es una técnica que puede llevarse a  cabo al proporcionar a los microorganismo un medio favorable para su crecimiento. Ello significa que las nuevas células dispongan de los nutrimientos necesarios en forma adecuada para emplearlos como materiales sintéticos,una fuente de energía y temperatura, oxigeno y otros factores que sean adecuados”. (Carpenter, 1969)
  
El crecimiento de los microorganismos se manifiesta de diferentes formas, dependiendo del tipo de dilución y siembra realizada.

“Las descripciones de colonias en placas de Agar incluirán tamaño, forma, color. Pueden obtenerse también datos semejantes de los medios de cultivos en medios...