tecnica histologica

PRACTICA No 2

TECNICA HISTOLOGICA

I.- OBJETIVO:

A partir de la observación del video “Técnica histológica en parafina”
El alumno explicará en qué consiste la técnica histológica, cuales son los pasos importantes de esta técnica y su utilidad en la medicina.



II.- INTRODUCCION:
Para llevar a cabo el estudio de los tejidos y células, es necesario efectuar una serie demecanismos que nos permitan mantener a dichas estructuras con sus características lo más cercano posible a su condición natural, los mecanismos en su conjunto reciben el nombre de técnica histológica: la técnica histológica comprende los siguientes pasos: localización del tejido, obtención del tejido, fijación, deshidratación, aclaración, inclusión, corte, fijación del corte, tinción y montaje. En laactualidad existen métodos modernos y prácticos que permiten la elaboración de los cortes histológicos en grandes cantidades y de manera más rápida.
Buscar en internet el video titulado “Técnica Histológica en parafina”.


Los colorantes son substancias químicas orgánicas complejas y pueden clasificarse en formas distintas, pero el enfoque más sencillo es basar su clasificación en su empleorespecto los componentes tisulares y celulares.
Los colorantes de empleo general son ácidos ó bases, pero de hecho son sales neutras, que tienen radicales ácidos ó básicos.
Cuando las propiedades de tinción de un colorante se localiza en un radical básico de una sal neutra, se denomina al colorante, básico, y los órganos y estructuras que lo captan se denominan basófilos. En éstos casos, lassubstancias basófilas que atraen los colorantes básicos son en sí ácidas; ejemplo, los ácidos nucléicos del núcleo y los componentes ácidos del citoplasma. En forma semejante cuando la propiedad de tinción se localiza en el radical ácido y las estructuras teñidas por él, ejemplo, el citoplasma en general, se denominan acidófilas .
El colorante nuclear que se emplea con más frecuencia es lahematoxilina, cuya propiedad de coloración depende de la presencia en su solución de su producto de oxidación, la hemateina. Cuando se tiñe con dicho colorante los núcleos tienen un color azul.
Los colorantes ácidos que suelen emplearse para teñir el citoplasma en general incluyen eosina, que dá un color rosado a todas las estructuras citoplasmáticas y substancias intercelulares.

A continuación sedescribirá como se efectúa esta técnica una vez que ya se tiene la preparación cortada por el micrótomo y note la diferencia con la película que observó.


1.- DESPARAFINACION:
Colocar la laminilla con el tejido a colorear, sobre un
puente de tinción y agregar las siguientes substancias:
a.-) Xilol durante 5 minutos, sin dejar secar la preparación.
b.-) Carbol-Xilol (cxc),durante 5 minutos.
c.-) Alcohol 96º durante 5 minutos.
d.-) Alcohol 70º durante .
e.-) Eliminar el exceso de alcohol con un lienzo, ó gasa,
cuidando de no tocar el tejido.


2.- HIDRATACION.
Colocar 4 cajas Petri con agua corriente y sumergir la
preparación en cada una de ellas durante un minuto.



3.- COLORACION Ó TINCION.
a).- En el puente detinción colocar la preparación y añadir
dos gotas de Hematoxilina durante 5 minutos.
b) Quitar el exceso de colorante .
c) Sumergir la preparación en agua corriente contenida en dos cajas de Petri.
d) Por baño de escurrimiento agregar con gotero,
alcohol ácido, al observar un vire de color morado a
color rojo hacer un lavado con agua corrientecontenida
en una de caja de Petri.
e) En una caja de Petri que contenga agua amoniacal
sumergir la preparación y observar un vire de rojo a
azul.
f) Colocar 4 cajas de Petri con agua destilada y sumergir la preparación en cada una de ellas durante 30 segundos.
g) Colocar la preparación en el puente de tinción y agregar
algunas gotas de Eosina cubriendo...