tipos de tinciones en microbiologia

Resumen

El mayor reto para la observación de microorganismos es el tamaño de las mismas, las cuales son tan pequeñas que resultan un poco difíciles de observar aun con el microscopio óptico. Otra de las dificultades para lograr apreciar bien una célula bacteriana es la falta de contraste entre la célula y el medio que la rodea. Para poder observar de manera más clara a los microorganismos seestudiaron diferentes métodos de tinción que ayudan a aumentar el contraste entre la célula y el medio que la rodea, logrando también la distinción de los diferentes tipos de componentes de la célula como por ejemplo, fájelos, cilios, esporas, paredes, etc.
Introducción
La mayor dificultad para observar a los microorganismos en un microscopio óptico además de su tamaño es el contrate que existeentre ellos y el medio en el que se encuentran, esto ha sido un problemas desde la antigüedad y desde entonces se has utilizado técnicas de tinción para una mejor observación. Uno de los científicos que dieron un gran aporte en este tema es Hans Christian Gram, quien siguiendo el método de Paul Ehrlich logro clasificar a las células en dos tipos: Gram positivas y Gram negativas.
El siguienteinforme trata acerca de los diferentes métodos de tinción utilizadas en la microbiología para la identificación de microorganismos y que han ayudado a una mejor compresión de las mismas.
Desarrollo
Las células generalmente son tratadas para coagular el protoplasma antes de teñirlas, este proceso es llamado fijación. Para bacterias, la fijación por el calor es lo más corriente, aunque también puedefijarse con sustancias químicas como formaldehido, ácidos y alcoholes. Después de la fijación, si se añade el colorante, no se producen ulteriores cambios estructurales en el protoplasma. La fijación se realiza habitualmente en células que han sido fijadas sobre un portaobjetos. Tratando después éste con el agente fijador, y siguiendo inmediatamente el proceso de tinción. La fijación producehabitualmente el encogimiento de las células; la tinción, por el contrario, hace que las células aparezcan mayores que lo que son realmente, de manera que las medidas de las células que han sido fijadas o teñidas no pueden realizarse con mucha precisión.
La mayoría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad específica por los materiales celulares. Muchos colorantesutilizados con frecuencia son moléculas cargadas positivamente (cationes) y se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los ácidos nucleicos y los polisacáridos ácidos.
Existen varios métodos de tinción y las más importantes son las siguientes.
Tinción de Gram (Christian Gram, 1844)
La tinción de Gram es uno de los métodos de tinción más importantes enel laboratorio bacteriológico. Su utilidad práctica es indiscutible y en el trabajo microscópico de rutina del Laboratorio de Microbiología las referencias a la morfología celular bacteriana (cocos, bacilos, positivos, negativos, etc.) se basan justamente en la tinción de GRAM.
La secuencia de la tinción es la siguiente: el Frotis fijado con calor se tiñe 1 min con Violeta Cristal, se lava conagua, se cubre con solución Yodada durante 1 min y se lava de nuevo con agua, decolorar con mezcla alcohol etílico/acetona. Escurrir y cubrir con Safranina (color de contraste) durante 20 seg. Lavar y secar.
Con base a la tinción Gram las bacteria se pueden dividir en dos grupos, Gram positivas y Gram negativas, las denominaciones positivo y negativo no tienen nada que ver con las cargaseléctricas, designan los diferentes grupos morfológicos de las células; esto hace que su tinción sea diferente.

Tinción de ZIEHL-NEELSEN (BAAR)
La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras.Se ha desarrollado una coloración de ácido-alcohol resistencia modificada que diferencia las especies de Nocardia (bacterias...