USO DE PCR EN LA AGRICULTURA
USO DE PCR EN LA AGRICULTURA
(Reacción en cadena de polimerasa)
En la PCR se separan las cadenas de la doble hélice del ADN mediantedesnaturalización térmica a temperaturas en torno a los 95°C, lo que conduciría a la inactivación de las DNA polimerasas ordinarias. La polimerasa Taq, en contraste, tiene su máxima actividad a 72 °C y sutermoestabilidad es tal que su vida media a 95°C es de 40 minutos, lo que la hace idónea para este tipo de procesos.
La reacción en cadena de la polimerasa, conocida como PCR por sus siglas en inglés(polymerase chain reaction), es una técnica de biología molecular desarrollada en 1983 por Kary Mullis, cuyo objetivo es obtener un gran número de copias de un fragmento de ADN particular, partiendo deun mínimo; en teoría basta partir de una única copia de ese fragmento original, o molde.
Para replicar el ADN, la técnica PCR hizo uso, en un principio, de la ADN polimerasa de la bacteriaEscherichia coli. Pero esta enzima resulta desactivada debido a la alta temperatura requerida para desnaturalizarla doble cadena del ADN, por lo cual debía agregarse enzima fresca al comenzar el tercer pasode cada ciclo. Este inconveniente fue solucionado de manera ingeniosa cuando se la reemplazó por su equivalente de la bacteria "termófila" Thermus aquaticus. En efecto, la ADN polimerasa de estemicrorganismo, denominada Taq polimerasa, actúa eficientemente entre los 75° C y los 80° C y resiste más de dos horas a 93° C. De esta manera es posible mezclar todos los componentes de la PCR al comenzarel primer ciclo y la reacción en cadena puede llevarse a cabo mediante equipos automatizados que realizarán los ciclos térmicos programados.
Thermus aquaticus: Esta bacteria vive a temperaturascomprendidas entre 50 y 80 °C, gracias a que sus enzimas resisten tales condiciones. Normalmente, a esas temperaturas las proteínas constitutivas de la mayoría de los seres vivos se desnaturalizan y no...
Regístrate para leer el documento completo.