acontecimeintos
Páginas: 3 (586 palabras)
Publicado: 24 de noviembre de 2013
Materiales y métodos
Cepa
La cepa utilizada durante el desarrollo del experimento será Acinetobacter calcoacticus previamente aislada por Cisneros (2011); proveniente sedimentos del ríoSabinal en Tuxtla Gutiérrez, Chiapas.
Medio
Se usará el medio mínimo de sales (MMS) para el crecimiento de Acinetobacter calcoaceticus, el cual contendrá por litro: 5 g de NH4Cl, 1.5g de K2HPO4, 0.5gde KH2PO4, 0.2g de MgSO4・7H2O, 0.01g de extracto de levadura y decaclorobifenilo a diferentes concentraciones como única fuente de carbono (Cisneros, 2011).
Preparación del contamínate
Sedisolverá 1 mg decaclorobifenilo (Sigma Aldrics, grado analítico) con 100 mL de HMN (heptametilpentano), para obtener una concentración de 1000 ppm, a esta solución se le llamara solución patrón de la cualse harán disoluciones, para obtener las concentraciones de 50, 75 y 100 ppm. Para adicionar el contaminante al medio se toman alicotas de 20 μl hasta obtener la concentración deseada (Adesbusoye etal., 2007).
Preparación del inoculo
La cepa Acinetobacter calcoaceticus se inoculará con 50 mL del medio MMS; dejándola crecer de 16-18 horas, a temperatura ambiente, se mantendrá en agitación a125 rpm; se medirá la biomasa por medio de densidad óptica en un espectrofotómetro (UV-VIS DR 5000 HACH) longitud de onda de 600 nm (Adebosoye et al., 2008).
Para determinar la cantidad de células/ mL, se desarrollara la técnica del número más probable (NMP), haciendo monitoreos cada 6 horas.
Desarrollo del experimento
Se pondrán 150 mL de medio MMS con contaminante en un matrazenlemeyer, se adicionaran 7.5 mL de cepa la tendrán una concentración 1 x 105 – 1 106 cel/mL, se realizará el experimento por 162 horas, a una temperatura de 28- 30ºC, se mantendrá en al agitadora a 125 rpm;se realizarán monitoreos a la hora 6, 12, 18, 24 y 36 durante las primeras 36 horas, después hacer monitoreos cada 36 horas (Cisneros, 2011).
Extracción de BPC’s
Se tomarán el matraz, se le...
Cepa
La cepa utilizada durante el desarrollo del experimento será Acinetobacter calcoacticus previamente aislada por Cisneros (2011); proveniente sedimentos del ríoSabinal en Tuxtla Gutiérrez, Chiapas.
Medio
Se usará el medio mínimo de sales (MMS) para el crecimiento de Acinetobacter calcoaceticus, el cual contendrá por litro: 5 g de NH4Cl, 1.5g de K2HPO4, 0.5gde KH2PO4, 0.2g de MgSO4・7H2O, 0.01g de extracto de levadura y decaclorobifenilo a diferentes concentraciones como única fuente de carbono (Cisneros, 2011).
Preparación del contamínate
Sedisolverá 1 mg decaclorobifenilo (Sigma Aldrics, grado analítico) con 100 mL de HMN (heptametilpentano), para obtener una concentración de 1000 ppm, a esta solución se le llamara solución patrón de la cualse harán disoluciones, para obtener las concentraciones de 50, 75 y 100 ppm. Para adicionar el contaminante al medio se toman alicotas de 20 μl hasta obtener la concentración deseada (Adesbusoye etal., 2007).
Preparación del inoculo
La cepa Acinetobacter calcoaceticus se inoculará con 50 mL del medio MMS; dejándola crecer de 16-18 horas, a temperatura ambiente, se mantendrá en agitación a125 rpm; se medirá la biomasa por medio de densidad óptica en un espectrofotómetro (UV-VIS DR 5000 HACH) longitud de onda de 600 nm (Adebosoye et al., 2008).
Para determinar la cantidad de células/ mL, se desarrollara la técnica del número más probable (NMP), haciendo monitoreos cada 6 horas.
Desarrollo del experimento
Se pondrán 150 mL de medio MMS con contaminante en un matrazenlemeyer, se adicionaran 7.5 mL de cepa la tendrán una concentración 1 x 105 – 1 106 cel/mL, se realizará el experimento por 162 horas, a una temperatura de 28- 30ºC, se mantendrá en al agitadora a 125 rpm;se realizarán monitoreos a la hora 6, 12, 18, 24 y 36 durante las primeras 36 horas, después hacer monitoreos cada 36 horas (Cisneros, 2011).
Extracción de BPC’s
Se tomarán el matraz, se le...
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