Activación del Complemento

Métodos para la evaluación de la respuesta inespecífica de fagocitosis y complemento
Inmunología Clínica

Fagocitosis
• Proceso dependiente del citoesqueleto que consiste en la
ingesta de partículas grandes y posterior destrucción por la
producción de moléculas microbicidas
• Fagocitos profesionales
• Mononucleares
• Monocitos
• Macrófagos
• Polimorfonucleares

• Fagocitos noprofesionales

• El proceso de fagocitosis comprende varios pasos
secuenciales:
• quimiotaxis
• adherencia de las partículas antigénicas a la superficie de los
fagocitos
• captación/ingestión (fagocitosis)
• muerte intracelular

• Los fagocitos reconocen u grupo de patrones altamente
conservados en la evolución.
• Las proteínas, glúcidos, lípidos y ARN bacteriano, y se
caracterizan porque son específicas de un grupo o clase de
patógenos, estas moléculas son esenciales para la
supervivencia o patogenicidad de los microbios.
• El reconocimiento de los antígenos por los receptores de los
fagocitos lleva a la internalización de los microbios dentro de
una vacuola (fagosoma) y fusión con los lisosomas
(fagolisosoma) donde se destruirán los patógenos.

• Receptor de manosa:Reconoce carbohidratos con gran
número de manosas.
• Posee la capacidad de unir y mediar la fagocitosis de partículas
de lipoproteínas de baja densidad oxidadas o acetiladas.

Evaluación de la actividad
fagocitica
• La citometría de flujo en el estudio de la actividad fagocítica
de neutrófilos y monocitos presenta ciertas ventajas frente a
otros métodos:
• se puede evaluar la capacidadfagocitaria en muestras
relativamente pequeñas
• es una técnica rápida que permite estudiar características
bioquímicas y funcionales de forma simultánea

• Cuando se estudian defectos de la fagocitosis por citometría
de flujo se suelen realizar dos tipos de ensayos que ofrecen
información complementaria:
• - Cuantificación de la actividad fagocítica de neutrófilos y
monocitos midiendola ingestión de la bacteria Escherichia coli
conjugada con FITC
• - Estudio de la actividad fagocítica de los neutrófilos midiendo
el estallido respiratorio después de su estimulación con
Escherichia coli

- Cuantificación de la actividad fagocítica de neutrófilos y
monocitos midiendo la ingestión de la bacteria
Escherichia coli conjugada con FITC
• - La actividad fagocítica expresadacomo el porcentaje de
neutrófilos y monocitos que han ingerido la bacteria
• - El índice de fagocitosis o número de bacterias ingeridas por
las células que se expresa en base a la mediana de intensidad
de fluorescencia de la Escherichia coli-FITC detectada

- Estudio de la actividad fagocítica de los neutrófilos
midiendo el estallido respiratorio después de su
estimulación con Escherichiacoli
• - El porcentaje de neutrófilos que presentan estallido
respiratorio después de ser estimulados con la bacteria.
• - El índice de estimulación (IE) que se calcula como el cociente
entre la intensidad media de fluorescencia de (IMF) de la
población de neutrófilos rodamina 123+ (FL1) del tubo de
muestra estimulada con Escherichia coli, y la IMF de la
población de neutrófilos rodamina 123-del tubo de muestra
control negativo

Complemento

El estudio de los factores del Complemento es
la determinación de los componentes de uno
de los factores que influyen directamente en la
inflamación llamada cascada del Complemento

C3, C4,

Actividad del complemento total
ó CH50.

La cascada puede ser iniciada por diversos factores,
principalmente la unión de complejosantigeno-anticuerpo.
El producto final de la cascada es la unidad de ataque de
la membrana celular , que genera agujeros en las bacterias
pero también en ocasiones en células del propio cuerpo
(enfermedades auto-inmunes).
Cuando la misma bacteria vuelve a infectar a un individuo
se produce la activación del complemento por la llamada
vía alterna, desde el componente C3 , y desde esta
activación...