Antibiograma

TRABAJO PRÁCTICO Nº 11
Pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos específicos
(Antibiogramas)
OBJETIVOS:
 Mencionar las distintas técnicas que permiten establecer el perfil de
susceptibilidad de las cepas involucradas en procesos infecciosos de
importancia clínica odontológica.
 Describir la metodología empleada para obtener dicho perfil de
susceptibilidad.
 Interpretar losresultados entregados por las distintas técnicas para una
adecuada indicación terapéutica.
Contenidos:
 Técnicas empleadas para la obtención de perfiles de susceptibilidad:
difusión en medio sólido, concentración inhibitoria mínima y concentración
bactericida mínima.
 Calidad de microorganismos capaces de ser evaluados por cada técnica.
Fundamento.
DESARROLLO.
La determinación del perfil desusceptibilidad de una cepa puede llevarse a
cabo por distintas técnicas.
Esta técnica varía según dos criterios fundamentales:
1.- El tipo de microorganismo (de crecimiento rápido, fastidioso, anaerobio
estricto)
2.- Según la localización del sitio afectado por la infección (orina, LCR,
humores estériles, colecciones poli-microbianas, piel y partes blandas,
osteomielitis, hemocultivos)
Latécnica de difusión en medio sólido (Antibiograma por difusión en medio
sólido) es una técnica semicuantitativa y es la más utilizada para las especies
de fácil desarrollo, que proviene de sitios que no comprometen la vida del
paciente. Ej: Enterobacterias causales de infecciones urinarias bajas, cocos
positivos (Streptococcus pneumoniae), cocobacilos gram negativos
(Haemophyllus influenzae)provenientes de infecciones de vías aéreas
superiores; cocos gram positivos (Staphylococcus aureus, Staphylococcus
coagulasa negativo) de piel y partes blandas.
Esta técnica fue descripta y se la conoce hasta estos días , como el método de
Kirby Bauer. Consiste en realizar una suspensión bacte riana en solución
fisiológica a partir de un cultivo puro de 24 hr, mono microbiano, de una cepabiotipificada. El inóculo es comparado con el tubo 0.5 de la escala de Mc
Farland equivalente a una suspensión bacteriana de 1.5 x 108 UFC/ml. El
inóculo recién preparado se siembra por medio de un hisopo por estriado

confluente en una placa con medio Muller Hinton. Dentro de los 20 minutos
posteriores a la inoculación de la placa, deben co locarse los discos de los
antimicrobianos a probar.Las series antibióticas varían según el
microorganismo y el sitio de infección primario (infección urinaria distinta de
neumonía) y eso se relaciona con la fármaco dinamia y fármaco cinética de los
quimioterápicos empleados.
3 a 4 colonias
+

S.aureus
Cultivo de 24hs

5 ml
Solución
Fisiológica

0.5 Mc F

HISOPADO DE LA PLACA

COLOCACIÓN DE DISCOS:
Una vez hisopada la placa, secolocan los discos de antibiótico, en sentido de
las agujas de reloj, a una distancia que permita la lectura de los halos de
inhibición. En una placa de 9 cm de diámetro no deben colocarse más de 6
discos.

INCUBACIÓN Y LECTURA:
Las placas se incuban invertidas a 36º C+1 durante 18 a 24 hs dependiendo
del microorganismo.
La lectura se realiza midiendo los halos de inhibición formadosalrededor de los
discos con una regla o calibre. Los valores en expresados en mm se interpolan
en tablas que establecen los puntos de corte en S (sensible) / I (intermedio) / R
(resistente). Y esos resultados son los que se brindan en el info rme.

En los casos que la infección se encuentre en sitios estériles del organismo
(líquido céfalo raquídeo, humores acuosos, abscesos hepáticos, sepsis,osteomielitis, mediastinitis, endocarditis…) es necesario conocer la
concentración de antimicrobianos capaz de inhibir el crecimiento microbiano
(CIM: Concentración inhibitoria mínima) y aquella concentración capaz de
provocar la muerte bacteriana (CBM: Concentración bactericida mínima) en el
sitio de la infección.
Otras utilidades, es la de conocer la concentración inhibitoria de nuevas...