Aplicación De Procesos De Separación Para La Identificación Y Conteo De Células.
Páginas: 6 (1397 palabras)
Publicado: 24 de enero de 2013
PRÁCTICA 1: APLICACIÓN DE PROCESOS DE SEPARACIÓN PARA LA IDENTIFICACIÓN Y CONTEO DE CÉLULAS.
INTRODUCCIÓN.
Soluciones isotónicas, hipotónicas e hipertónicas.
La osmosis es el fenómeno de difusión de agua a través de una membrana semipermeable (o de permeabilidad diferencial o de permeabilidad selectiva).
La presión osmótica se como la medidade la tendencia a diluirse una solución separada del solvente puro por una membrana semipermeable
Se llaman soluciones isotónicas aquellas que manifiestan la misma presión osmótica frente a una determinada membrana, es decir, la solvente atraviesa la membrana en igual proporción en ambos sentidos, por lo que no manifiesta efecto resultante alguno.
Son ejemplos de soluciones isotónicas elplasma sanguíneo y el protoplasma de los hematíes. El hematíe es la célula de características especialmente favorables al estudio de la presión osmótica y, por eso, suele representarse como ejemplo muy demostrativo.
Su membrana puede compararse a la membrana semipermeable ideal, aunque no es rigurosamente comparable a una membrana artificial de este tipo. Si el glóbulo rojo se
introduce en aguadestilada, el agua pasará la pared hacia el protoplasma aumentando el volumen celular y distendiendo la membrana hasta la rotura Este fenómeno llamado hemólisis, se produce tanto en agua destilada como en soluciones hipotónicas desde un cierto límite de dilución (soluciones de menor presión osmótica). Si el hematíe se coloca en un medio hipertónico (de mayor presión osmótica), el efecto será desentido contrario, saliendo agua del protoplasma a la solución extracelular. Como resultado se retrae la membrana del glóbulo rojo debido a la concentración del protoplasma, y por eso los hematíes en estas condiciones aparecen al microscopio con su característico aspecto estrellado. En un medio de igual presión osmótica que el protoplasma (isotónico) el hematíe permanece inalterable. Estos hechos, defácil observación, ponen de manifiesto la importancia que tiene la constante osmótica del medio intersticial para la integridad celular.
Las células rodeadas por un líquido hipertónico pierden agua cuando el soluto de éste líquido no es capaz de atravesar la membrana En cambio, cuando el soluto puede atravesar la membrana no se produce deshidratación sino, por el contrario, hidratación y aumento devolumen.
Objetivo: Identificar y cuantificar esporas del hongo Beauveria bassiana, así también observar eritrocitos y espermatozoides.
Materiales y equipo.
2 portaobjetos.
2 cubreobjetos.
2 pipetas de plástico.
Algodón.
Alcohol.
2 tubos de vidrio para muestra.
1 tubo de ensayo con cultivo de Beauveria bassiana.
1 tubo con diluyente tween al 0.01 %.
1 vaso de precipitado condilución salina al 10 %.
1 cámara de Neubauer.
1Cubre hematimetro.
1 micropipeta.
1 asa de platina.
1 microscopio.
1 centrifugadora.
10 ml de sangre por grupo.
Semen.
METODOLOGÍA
A) Observación de esporas de Beauveria bassiana.
1.- Preparación de los materiales y equipo; para este proceso se limpian los materiales de cristalería (portaobjetos y cubreobjetos) así también como elmicroscopio ocupando algodón con alcohol.
2.-Añadir el diluyente Tween 80 al 0.01% a la cepa de Beauveria bassiana durante este procedimiento se remueve una cantidad de cultivo considerable con un asa de platina sin penetrar el medio de cultivo.
3.-Obtener la dilución deseada y agregar a otro tubo de ensaye.
4.-Tomar una muestra de la dilución obtenida con una micropipeta y depositar en lacámara de Neubauer colocándole posteriormente el cubre hematimetro.
5.-Observar la muestra en el microscopio con el objetivo 10x y para contabilizar las esporas de Beauveria bassiana con el objetivo 40x.
B) Observación de espermatozoides.
1.-Obtener una muestra de semen.
2.-Reposar en un tiempo de 20 minutos y tomar unos milímetros de semen depositándolo en un portaobjetos con una...
INTRODUCCIÓN.
Soluciones isotónicas, hipotónicas e hipertónicas.
La osmosis es el fenómeno de difusión de agua a través de una membrana semipermeable (o de permeabilidad diferencial o de permeabilidad selectiva).
La presión osmótica se como la medidade la tendencia a diluirse una solución separada del solvente puro por una membrana semipermeable
Se llaman soluciones isotónicas aquellas que manifiestan la misma presión osmótica frente a una determinada membrana, es decir, la solvente atraviesa la membrana en igual proporción en ambos sentidos, por lo que no manifiesta efecto resultante alguno.
Son ejemplos de soluciones isotónicas elplasma sanguíneo y el protoplasma de los hematíes. El hematíe es la célula de características especialmente favorables al estudio de la presión osmótica y, por eso, suele representarse como ejemplo muy demostrativo.
Su membrana puede compararse a la membrana semipermeable ideal, aunque no es rigurosamente comparable a una membrana artificial de este tipo. Si el glóbulo rojo se
introduce en aguadestilada, el agua pasará la pared hacia el protoplasma aumentando el volumen celular y distendiendo la membrana hasta la rotura Este fenómeno llamado hemólisis, se produce tanto en agua destilada como en soluciones hipotónicas desde un cierto límite de dilución (soluciones de menor presión osmótica). Si el hematíe se coloca en un medio hipertónico (de mayor presión osmótica), el efecto será desentido contrario, saliendo agua del protoplasma a la solución extracelular. Como resultado se retrae la membrana del glóbulo rojo debido a la concentración del protoplasma, y por eso los hematíes en estas condiciones aparecen al microscopio con su característico aspecto estrellado. En un medio de igual presión osmótica que el protoplasma (isotónico) el hematíe permanece inalterable. Estos hechos, defácil observación, ponen de manifiesto la importancia que tiene la constante osmótica del medio intersticial para la integridad celular.
Las células rodeadas por un líquido hipertónico pierden agua cuando el soluto de éste líquido no es capaz de atravesar la membrana En cambio, cuando el soluto puede atravesar la membrana no se produce deshidratación sino, por el contrario, hidratación y aumento devolumen.
Objetivo: Identificar y cuantificar esporas del hongo Beauveria bassiana, así también observar eritrocitos y espermatozoides.
Materiales y equipo.
2 portaobjetos.
2 cubreobjetos.
2 pipetas de plástico.
Algodón.
Alcohol.
2 tubos de vidrio para muestra.
1 tubo de ensayo con cultivo de Beauveria bassiana.
1 tubo con diluyente tween al 0.01 %.
1 vaso de precipitado condilución salina al 10 %.
1 cámara de Neubauer.
1Cubre hematimetro.
1 micropipeta.
1 asa de platina.
1 microscopio.
1 centrifugadora.
10 ml de sangre por grupo.
Semen.
METODOLOGÍA
A) Observación de esporas de Beauveria bassiana.
1.- Preparación de los materiales y equipo; para este proceso se limpian los materiales de cristalería (portaobjetos y cubreobjetos) así también como elmicroscopio ocupando algodón con alcohol.
2.-Añadir el diluyente Tween 80 al 0.01% a la cepa de Beauveria bassiana durante este procedimiento se remueve una cantidad de cultivo considerable con un asa de platina sin penetrar el medio de cultivo.
3.-Obtener la dilución deseada y agregar a otro tubo de ensaye.
4.-Tomar una muestra de la dilución obtenida con una micropipeta y depositar en lacámara de Neubauer colocándole posteriormente el cubre hematimetro.
5.-Observar la muestra en el microscopio con el objetivo 10x y para contabilizar las esporas de Beauveria bassiana con el objetivo 40x.
B) Observación de espermatozoides.
1.-Obtener una muestra de semen.
2.-Reposar en un tiempo de 20 minutos y tomar unos milímetros de semen depositándolo en un portaobjetos con una...
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