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CULTIVO Y AISLAMIENTO DE BACTERIAS, METABOLISMO BACTERIANO
Julián Castaño Villada, Carlos Fernando Rojas C.
Departamento de Bioingeniería
Universidad de Antioquia
Medellín- Colombia
Mayo 28 de 2015

RESUMEN

A continuación se mostraran dos sesiones prácticas, cuyo fin es mostrar la actividad bioquímica de las bacterias y conocer su metabolismo, los agares donde se ven beneficiadas algunas deestas con un buen crecimiento y los factores que alteran el desarrollo de las bacterias en cada agar, también la composición de los agares y/o medios de cultivo usados en el laboratorio para estas dos sesiones. En la primera parte analizamos el crecimiento de 3 microorganismos diferentes en cuatro agares distintos, dos de estos microorganismos también los analizamos en medio líquido y semisólido(Tubos). En la segunda sesión analizamos una muestra problema realizando varias pruebas posteriormente descritas.

Palabras Clave: Agar, Bacteria, Muestra, Medio.

INTRODUCCIÓN

Las bacterias al igual que los organismos vivos requieren de nutrientes apropiados y condiciones óptimas para su crecimiento. Las necesidades nutricionales básicas pueden ser suministradas en el laboratorio mediante el usode medios de cultivo artificiales, los cuales aportan a los microrganismos, una fuente de carbono, de nitrógeno, elementos metálicos como: Ca, Zn, Na, Cu, Mg, Mn y Fe; además de otros minerales como fosforo, azufre y vitaminas.

CLASES DE MEDIOS DE CULTIVO.
Medios simples.
Agar Nutritivo: Contiene extracto de carne, peptona y agar-agar.
Caldo Nutritivo: Contiene extracto acuoso de carne adicionadode peptona al 1% y Cloruro de
Sodio al 0.5% (Ej.: Caldo BHI (Brain Heart Infusion/Infusión Cerebro Corazón), Caldo TSB (Caldo
de Soya Tripticasa), y Caldo Nutritivo).
Agar Base Sangre: Medio sólido que contiene peptona, enriquecido con sangre desfibrinada de
conejo al 7%; usado para el desarrollo de todo tipo de bacterias y especialmente para observar la
actividad hemolítica.
1. Medios selectivosy diferenciales.
Agar MacConkey: Medio selectivo para el crecimiento de enterobacterias. Contiene peptona,
sales biliares, lactosa y rojo neutro como indicador de pH (evidencia la fermentación de la lactosa
por el cambio de color).
Agar SS (Salmonella-Shigella): Contiene peptona, lactosa, bilis de buey desecada, citrato sódico,
tiosulfato sódico, citrato de hierro (III) y amonio, verde brillantey como indicador de pH Rojo
neutro, que evidencia la fermentación o no de lactosa. Las colonias de microorganismos lactosanegativos
son incoloras y las de microorganismos lactosa-positivos son rosadas hasta rojas.
También pueden determinarse microorganismos formadores de H2S, por la formación de un
centro negro en la colonia.
Agar EMB (Eosina Azul de Metileno): Contiene colorantes que impiden elcrecimiento de
bacterias Gram-positivas. E. coli crece formando colonias con brillo metálico característico, por la
cristalización de la Eosina.
Medio de Telurito: Permite el crecimiento de Corynebacterias, Staphylococcus y Listeria. El
Telurito de potasio al 2%, es reducido por las Corynebacterias reductoras, apareciendo colonias
de color gris-negro.
Los microorganismos realizan distintos procesosquímicos que definen a la célula, los cuales son de ruta metabólica, y esto es conocido como metabolismo. En el metabolismo se encuentran dos grandes grupos: los procesos anabólicos (síntesis de una sustancia) y los procesos catabólicos (degradación de una sustancia); todos estos procesos son llevados acabo por enzimas.
En el laboratorio se pueden simular medios de cultivo los cuales evidencianlos cuales poseen ciertas características específicas para determinar los comportamientos en un microorganismo, como lo es el sustrato que consumen, indicadores de pH, de óxido reducción, entre otros; mediante estos comportamientos es que se observa la producción de enzimas específicas, reacciones de fermentación, descarboxilaciones, crecimiento en presencia de oxigeno o no, entre otras. Esto con...