Atencion integral a la primera infancia colombia

Biología Molecular II







Carlos Eduardo Martínez
Ana milena López







Universidad Cooperativa de Colombia
Grupo 721
2014
2° Semestre
Biología Molecular II




Trasngenesis

Presentado A
Lucila Riascos

Integrantes
Carlos Eduardo Martínez
Ana milena López




Universidad Cooperativa de Colombia
Grupo 721
2014
2° Semestre
Contenido
AISLAMIENTO DE GENES POR COMPLEMENTACIÓN 4
AISLAMIENTO DEGENES USANDO ADN SINTÉTICO 4
Usando oligonucleótidos sintéticos 5
AISLAMIENTO DE GENES UTILIZANDO ANTICUERPOS 5
AISLAMIENTO DE GENES UTILIZANDO SUS ARN MENSAJEROS 5
Vectores virales 6
Retrovirus 6
Los adenovirus 7
adenoasociados 7
HERPESVIRUS 7
Virus vaccinia 8
Transferencia genética 9
Micro-inyección 9
Transfeccion 10
Electroporacion 10
Bibliografía 12









1: AISLAMIENTO DE GENES PORCOMPLEMENTACIÓN
Los primeros genes microbianos fueron aislados mediante el principio de la complementación. Este procedimiento se fundamenta en el trabajo previo de los genetistas que, desde mucho tiempo atrás, habían caracterizado indirectamente a los genes. El trabajo clásico en genética microbiana implicaba el aislamiento y caracterización de bacterias mutantes, es decir, variantes que se generanespontáneamente o por un tratamiento químico o físico.
1. Primero se requiere crear un conjunto de clonas que contengan segmentos de un tamaño adecuado. Lo que se hace es someter una preparación del ADN total de la bacteria a estudiar a la acción de alguna enzima de restricción.
2. La reacción se controla para generar segmentos de unos 5 a 10 mil pares de bases, cada uno capaz de contener unoscuantos genes.
3. Esta colección de fragmentos se liga a un vector de clonación y se introduce a células de la cepa mutante

2: AISLAMIENTO DE GENES USANDO ADN SINTÉTICO
1. En primer lugar; sabemos que las proteínas son codificadas por los genes, a partir de la secuencia de aminoácidos de una proteína, se puede inferir la secuencia de ADN que la codifica
2. Utilizando este conocimiento se puedendiseñar oligonucleótidos sintéticos cuya secuencia sea complementaria al gene correspondiente. Aquí entra en juego la asombrosa capacidad de asociación específica de las moléculas de ADN así que, en principio,
3. utilizando un pequeño segmento de ADN sintético (un numero de bases), podríamos hacerlo hibridar con nuestro conjunto de clonas y detectar su asociación específica con el gen que codificapara la proteína de la cual tendría una secuencia.




Usando oligonucleótidos sintéticos
A partir de la secuencia de aminoácidos de una proteína, podemos deducir la secuencia del ADN que la codifica, utilizando el código genético (en realidad, sólo de manera imperfecta, debido a que un mismo aminoácido puede ser codificado por más de un triplete o codón). En todo caso, en ciertas regiones favorablesse puede esperar que la secuencia deducida corresponda muy cercanamente a la original.
Si se sintetiza un oligo con esta secuencia y se marca radiactivamente, tenemos una sonda o detector que mediante una hibridación, permite detectar su secuencia complementaria.


3: AISLAMIENTO DE GENES UTILIZANDO ANTICUERPOS
Las proteínas, en particular; cuando son extrañas a un animal, inducen en éste laproducción de anticuerpos. Estas moléculas son, a su vez, proteínas con características que pueden ser usados como reactivos que reconocen, en medio de mezclas complejas, las sustancias específicas que indujeron su producción. Imaginemos que inyectamos una proteína de interés en un conejo. A partir del suero sanguíneo de este conejo podemos obtener anticuerpos dirigidos contra dicha proteína hay quetener en cuenta el ADN de todos los organismos es similar, pero la manera como éste se expresa para formar proteínas específicas debe ser muy diferente


4: AISLAMIENTO DE GENES UTILIZANDO SUS ARN MENSAJEROS
una hebra de ARn transcrita , de manera reversa hacia ADN. Esto es, en principio, posible: la información codificada en la secuencia; esta en la molécula de ARN. Lo que se requiere es una...