balance

Balance de fermentación
Hipótesis
Saccaromyces cerevisiae como anaerobio facultativo en un ambiente anoxigénico y con glucosa como sustrato llevará a cabo el proceso metabólico de la fermentación alcohólica, teniendo como productos etanol y CO2, entonces estos se podrán determinar mediante métodos como el de Conway y la determinación gravimétrica de CO2 precipitado como BaCO3.

Objetivogeneral
Cuantificar experimentalmente los productos (etanol, y CO2), así como la cantidad de sustrato (glucosa), requerido en el proceso de fermentación alcohólica de Saccharomyces cerevisiae mediante el balance de carbonos y oxido-reducción.

Objetivos particulares
Realizar el análisis cuantitativo de la glucosa fermentada para la realización del balance de fermentación.
Realizar el balance secarbonos y el balance de óxido-reducción con los datos obtenidos.
Realizar el análisis cuantitativo de los productos de fermentación.
Determinar las características de las necesidades fisiológicas por la cual se lleva a cabo el proceso de fermentación en Saccharomyces cerevisiae.
Analizar las variables que afectan la fermentación.
Discutir sobre los métodos utilizados para evaluar lafermentación.







Resultados
De acuerdo al protocolo de la práctica se llevaron a cabo se obtuvieron los siguientes resultados.
1. Curva tipo de etanol
Tabla 1. Lecturas de absorbencias a 445nm de etanol
μg de etanol
Absorbancia a 445 nm
0
1.199
250
1.191
500
0.963
1000
0.810
1500
0.643
2000
0.503
2500
0.422

2. Determinación de etanol formado en la fermentación

Tabla 2.Absorbancias a 445 nm obtenidas por el método de Conway para la determinación de etanol en los distintos sistemas de reacción y con distintas alícuotas.
Muestras
Absorbencia a 445 nm
0.2 ml de muestra fermentada
0.692
0.4 ml de muestra fermentada
0.430
1 ml de muestra testigo
1.029

3. Curva tipo de glucosa
Tabla 3. Absorbancias a 540nm obtenidas por el método del DNS paraconcentraciones de glucosa de 0 a 500 µg para la construcción de una curva tipo.
μg de glucosa
Absorbencia a 540 nm
0
0
100
0.204
200
0.354
300
0.513
400
0.665
500
0.761

4. Determinación de glucosa residual.
Tabla 4. Absorbancias a 540nm obtenidas por el método del DNS para la determinación de la glucosa residual en los distintos sistemas de reacción y con distintas alícuotas
MuestrasAbsorbencia a 540 nm
0.5 ml de sobrenadante líquido diluido 1:20
0.014
0.3 ml de sobrenadante líquido diluido 1:20
0.024
1 ml de sobrenadante testigo sin diluir
0.251

5. Determinación de C02.
Tabla 5. Resultados obtenidos para la determinación gravimétrica del CO2 por el método de precipitación como BaCO3.
Muestras
Peso en gramos (g)
Papel filtro
0.8248
Papel filtro + BaCO3
0.9040BaCO3de fermentación
0.0792
Papel filtro testigo
0.8252
Papel filtro + BaCO3testigo
0.8960
BaCO3testigo
0.0782








Tabla 6. Resultados obtenidos en el balance de Fermantación
Sustrato
Glucosa
Etanol
CO2
mmol
0.993
1.36
0.43

1
1.36
0.43
Estado de oxidación por cada molécula
0
-2
+2
Estado oxidado del producto
-
-
0.86
Estado reducido del producto
-
-2.72
-Carbono recuperado
6
2.72
0.43

-
10.31
-
Carbono recuperado total
52.5%

Cálculos:

Estado de oxidación= N° átomos O2 -

Índice O/R=


Carbono recuperado=
%Carbono recuperado de toda la fermentación
%C recuperado=
6C----------------------------------------100%
2.72 etanol + 0.43 CO2 -------------x% X= 52.5%
Discusión de resultados
Llevamos a cabo unproceso de fermentación, en donde a partir de la glucosa (sustrato) se obtuvieron etanol y dióxido de carbono como productos, este proceso de fermentación se llevó a cabo con la presencia de una levadura, Saccharomyces cerevisiae.
El proceso de fermentación alcohólica, es llevado a cabo por levaduras en condiciones anaerobias, con la finalidad de producir energía y la reoxidación de algunas enzimas....