Biotecnología en Reproducción Bovina

BIOTECNOLOGÍA
EN REPRODUCCIÓN
BOVINA
Yael Filipiak y Clara Larocca

Universidad de la República
Facultad de Veterinaria
Área de Biotecnología de la Reproducción Animal
Montevideo , Uruguay

BIOTECNOLOGÍA EN REPRODUCCIÓN
BOVINA
MANUAL TEÓRICO-PRÁCTICO
Dras. Yael Filipiak y Clara Larocca, MsC.

Proyecto apoyado por MEAAP-UDELAR

(Métodos Alternativos de Aprendizaje,Universidad de la República)
Facultad de Veterinaria – Universidad de la República
Departamento de Reproducción Animal
Área de Biotecnología
Montevideo, República Oriental del Uruguay
Julio de 2012

Biotecnología en Reproducción Bovina
Tabla de Contenidos:
FERTILIZACIÓN IN VITRO EN BOVINOS ........................................................................ 1INTRODUCCIÓN......................................................................................................................... 1
TECNICA Y METODOLOGIA DE LA FECUNDACION IN VITRO EN EL BOVINO ............................. 2
CULTIVO Y MEDIOS ................................................................................................................... 2
RECUPERACION DE LOS COMPLEJOS CUMULUS-OVOCITOS (COC).......................................... 3
MADURACIÓN IN VITRO............................................................................................................ 7
FERTILIZACIÓN IN VITRO O INSEMINACIÓN.............................................................................. 9
DESARROLLO INVITRO:........................................................................................................... 11
TRANSFERENCIA DE EMBRIONES EN BOVINOS ........................................................ 15

INTRODUCCIÓN....................................................................................................................... 15
BASES FISIOLÓGICAS DEL FUNCIONAMIENTO OVÁRICO: ....................................................... 16
PREMISAS Y DESCRIPCIÓNDE LA TÉCNICA ............................................................................. 17
SUPEROVULACION DE LAS DONANTES DE EMBRIONES: ........................................................ 17
RECOLECCIÓN DE EMBRIONES................................................................................................ 18
AISLAMIENTO Y EVALUACION DE EMBRIONES....................................................................... 21
IMPLANTE DE EMBRIONES...................................................................................................... 23
CRIOPRESERVACIÓN DE EMBRIONES ....................................................................... 25INTRODUCCIÓN....................................................................................................................... 25
AGENTES CRIPROTECTORES: ................................................................................................... 27
MÉTODO CONVENCIONAL ...................................................................................................... 28
METODO DE LEIBO.................................................................................................................. 31
METODO CON ETILENGLICOL.................................................................................................. 31
ANEXO ........................................................................................................................ 33
PREPARACIÓN DE LAS SOLUCIONES STOCK ............................................................ 33

D-PBS (SOLUCIÓNSTOCK) ....................................................................................................... 33
PBS BUFFER ............................................................................................................................. 33
M-PBS – MEDIO DE ASPIRACIÓN Y LAVADO DE OVOCITOS .................................................... 34
M-TCM-199 – MEDIO DE MADURACIÓN...