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EXPERIMENTO 4
ACCION TAMPON (BUFFER) DE LAS PROTEINAS DEL SUERO SANGUINEO

Objetivos
Demostrar la acción amortiguadora de pH de las proteínas del suero sanguíneo
Método
Estimar losmiliequivalentes de HCl y de NaOH gastados para hacer variar el pH del suero sanguíneo, hacia el lado ácido y hacia el lado alcalino, respectivamente, y comparar estos resultados con losobtenidos al utilizar suero desproteinizado en lugar de suero sanguíneo

Procedimiento
1. Medir en un Erlenmeyer 2 ml de suero sanguíneo diluido al medio ( un ml de suero más un ml de aguadestilada) y titular con NaOH 0.01 N hasta un pH aproximado de 8.5, usando como indicador la fenoltaleína. Anotar el volumen gastado de la soda.
2. A la misma solución añadir dos gotas de anaranjado demetilo y titular con HCl 0.1 N hasta pH 3.4, anotar el volumen de ácido gastado. Para reconocer el color que toma este indicador a pH 3.4, preparar un tampón de dicho pH y añadirle dos gotas deanaranjado de metilo.
3. Repetir los pasos 1 y 2, utilizando en este caso suero desproteinizado (o agua destilada). Para obtener el suero desproteinizado, mida cierto volumen de suero en untubo de ensayo, y caliente en baño María hirviente por dos minutos; después de filtrar o centrifugar, usar el filtrado o el sobrenadante, según el caso

Resultados

1. Con los datos obtenidosen este experimento complete la siguiente tabla:

SUERO SANGUINEO
AGUA DESTILADA
Gasto de NaOH 0.01 N en ml.


Gasto de HCl 0.1 N en ml.



2. Estimar los micromoles omiliequivalentes de ácido y base necesario para hacer cambiar en una unidad el pH del suero y del agua destilada.

SUERO SANGUINEO
AGUA DESTILADA
Gasto de NaOH 0.01 N en miliequivalentes


Gasto deHCl 0.01 N en miliequivalentes



INTERROGANTES
1. ¿Cuántos grupos ionizables tiene el pentapeptido H-K-M-A-D-E?
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