Cromatografia De Aminoacidos Y Espectofotometria

ESTUDIO DE AMINOACIDOS
* CROMATOGRAFIA Y ESPECTOFOTOMETRIA

INTRODUCCION
El estudio de los aminoácidos y proteínas es extenso por lo que requiere tiempo y determinación para poder comprender sobre ellos. Esta práctica es un seguimiento en el estudio de aminoácidos y en el cual se estudiaron algunas técnicas para su detección y comprobación en extractos obtenidos de semilla de soya, la cualse trabajara a lo largo de las siguientes prácticas para llevar un análisis completo sobre este tipo de semilla y sus componentes. Se realizó un estudio de aminoácidos con la técnica de la cromatografía utilizando una cromatoplaca de aluminio en la cual se deben puntear cada muestra a analizar, tanto muestras patrones como las muestras de hidrolizados obtenidos anteriormente esta pruabaconsistioen dejar correr por el medio de sostén un solvente revelador, este solvente lava junto con la mezcla de sustancias aplicadas previamente, durante este proceso las moléculas de la mezcla son arrastradas por el lavado a distintas velocidades, resultando en la separación de estas, que luego de ser puestas en la cámara, se miden las distancias recorridas por cada sustancia estudiada para realizar loscálculos posteriores. Seguidamente se realizo la prueba de espectrofotometría que es una de las técnicas experimentales más utilizadas para ladetección específica de moléculas. Se caracteriza por su precisión, sensibilidad y suaplicabilidad a moléculas de distinta naturaleza (contaminantes, biomoléculas, etc) y el estado de agregación (sólido, líquido, gas). Los fundamentos físico-químicos delaespectrofotometría son relativamente sencillos, en esta prueba se hace uso del espectrofotómetro, el cual es de importancia para la toma de algunos datos sencillos que llevaran a la determinación de aminoácidos. A continuación se muestran los datos obtenidos en ambas técnicas.
OBJETIVOS
* 2.1 Determinar La concentración de aminoácidos en diferentes soluciones, patrón y muestra de soya.
2.2Analizar los resultados de la prueba cromatografica.
* 2.2 Comprender y utilizar la “Espectrofotometría” en la cuantificación de proteínas extraídas de una muestra vegetal.

MARCO TEORICO

* 3.1 LA CROMATOGRAFÍA
Se define como un método de separación relativamente rápido, basado en la distribución selectiva de los componentes a separar, entre dos fases inmiscibles, denominadas FASEESTACIONARIA y FASE MÓVIL. Las dos fases deben tener naturaleza estructural similar y deben permanecer en contacto pero no deben mezclarse. Con base en lo anterior, la denominada FASE ESTACIONARIA, normalmente es un material SÓLIDO, poroso y adsorbente y la FASE MÓVIL un LÍQUIDO constituido por un solvente o mezcla de solventes que tengan una similitud estructural con la fase sólida. Estascaracterísticas del sistema cromatográfico, lo hacen altamente eficiente para separar mezclas de sustancias que tienen gran semejanza en su estructura química y sean afines con las dos fases del sistema, lo cual no es posible por otros métodos como el de destilación o extracción con solventes ya estudiados anteriormente.

La separación se fundamenta en diferentes principios como la absorción, adsorción,reparto y
arrastre mecánico, de tal manera que se establece una competencia entre las dos fases por los componentes a separar, los cuales se fijan selectivamente sobre la fase estacionaria en función de sus diferentes velocidades de migración al ser llevados por la fase móvil a través de la estacionaria.

Es importante resaltar, que todos los componentes del sistema cromatográfico y loscomponentes de la mezcla a separar deben ser afines en cuanto a su naturaleza química, es decir si las sustancias a separar tienen naturaleza polar, también el sistema seleccionado debe ser polar. Igualmente si son apolares o poco polares el sistema también debe serlo, para así garantizar la separación con base en las pequeñas diferencias de los tres. Existen diferentes tipos de cromatografía, a...