CROMATOGRAFIA EN COLUMNA


CROMATOGRAFIA EN COLUMNA (CC)
OBJETIVO
Emplear la técnica de cromatografía de columna para la separación de un compuesto orgánico en este caso la antocianina de la col morada.
MATERIALREACTIVOS
2 Bureta Gel de sílice
1 Soporteuniversal Hexano
1 Pinzas de doble presión Sal
2 Pipeta volumétrica de 1ml pigmentos (disolventes y agua)
2 Matraz Erlenmeyer 250ml isopropano
1embudo de cuello corto Etano
Algodón
Varilla de vidrio
Papel filtro

METODOLOGIA
Para empacar la columna sujetarla en el soporteuniversal con las pinzas, revise la llave y manténgala en posición de cerrado.
Se Introdujo hasta el fondo un pequeño pedazo de algodón ayudándonos con la varilla de vidrio presionamos suavemente elalgodón para que quedara bien colocado y sin burbujas, en seguida introdujimos un círculo de papel filtro.
Preparamos una suspensión de 10g de gel sílice para columna en Hexano y agitamos que se disolviócompletamente evitando que se formaran grumos y no dejando secar la mescla.
Atreves de un embudo de cuello corto se vertió la suspensión en la columna golpeando ligeramente con los dos dedos para queel empacado sea uniforme.
Abra la llave para eliminar el exceso de disolvente teniendo cuidado de no dejar secar el gel de sílice.
Con una pipeta vierta con cuidado la mezcla problema, para que quedecolocada uniformemente por encima del gel de sílice.
Abra la llave para que salga el eluyente y se adsorba la muestra aplicada, cuidando que no se seque el gel de sílice, eluya la muestra con lamezcla el disolvente establecido para la separación.
Coloque fracciones (eluatos) en función del cambio de color en forma visual y controle la separación, haciendo cromatografía en capa fina a cada una...