Cuantificación de Porteínas
Páginas: 4 (865 palabras)
Publicado: 6 de abril de 2014
Cuantificación de Proteínas.
La determinación de la concentración de proteínas en una muestra biológica es un procedimiento rutinario que se realiza en un laboratorios de investigación y que es degran utilidad para los procedimientos de western-blot, purificación de proteínas, diagnóstico de enfermedades y para otra serie de propósitos.
Existen muchos métodos para la cuantificación deproteínas. Entre los que se encuentran: la absorbencia en luz UV; formación de derivados químicos; la unión de proteínas con los colorantes.
Entre los métodos colorímetros para la detección deproteínas se encuentran: Biuret, Lowry, ácido bicinconínico (BCA); así como los derivados fluorimétricos como o-ftalaldehído.
En estos métodos la intensidad de la coloración de directamente proporcionala la cantidad de proteínas. Estas reacciones son bastante específicas y existen un grupo limitado de reactivos que interfieren con ellas. La elección de los métodos varía de acuerdo a la sensibilidadde la reacción y la cantidad de proteína presente en la muestra que se desea evaluar.
Identificación de proteínas mediante la reacción el Biuret
La presencia de proteínas en una mezcla se puededeterminar mediante la reacción del Biuret. El reactivo de Biuret contiene sulfato de cobre (CuSO4) en medio alcalino (hidróxido de sodio (NaOH), tartrato de sodio 34 potasio o hidróxido de potasio(KOH)). La reacción se basa en la formación de un compuesto de color violeta, debido a la formación de un complejo de coordinación entre los iones cobre (Cu2+) y los pares de electrones no compartidosdel nitrógeno que forma parte de los enlaces peptídicos.
La reacción debe su nombre al Biuret, una molécula formada a partir de dos de urea (H2N-CO-NH-CO-NH2), que es la más sencilla que dapositiva esta reacción, común a todos los compuestos que tengan dos o más enlaces peptídicos consecutivos en sus moléculas.
Método Bradford.
Se basa en la unión de un colorante, Comassie Blue...
La determinación de la concentración de proteínas en una muestra biológica es un procedimiento rutinario que se realiza en un laboratorios de investigación y que es degran utilidad para los procedimientos de western-blot, purificación de proteínas, diagnóstico de enfermedades y para otra serie de propósitos.
Existen muchos métodos para la cuantificación deproteínas. Entre los que se encuentran: la absorbencia en luz UV; formación de derivados químicos; la unión de proteínas con los colorantes.
Entre los métodos colorímetros para la detección deproteínas se encuentran: Biuret, Lowry, ácido bicinconínico (BCA); así como los derivados fluorimétricos como o-ftalaldehído.
En estos métodos la intensidad de la coloración de directamente proporcionala la cantidad de proteínas. Estas reacciones son bastante específicas y existen un grupo limitado de reactivos que interfieren con ellas. La elección de los métodos varía de acuerdo a la sensibilidadde la reacción y la cantidad de proteína presente en la muestra que se desea evaluar.
Identificación de proteínas mediante la reacción el Biuret
La presencia de proteínas en una mezcla se puededeterminar mediante la reacción del Biuret. El reactivo de Biuret contiene sulfato de cobre (CuSO4) en medio alcalino (hidróxido de sodio (NaOH), tartrato de sodio 34 potasio o hidróxido de potasio(KOH)). La reacción se basa en la formación de un compuesto de color violeta, debido a la formación de un complejo de coordinación entre los iones cobre (Cu2+) y los pares de electrones no compartidosdel nitrógeno que forma parte de los enlaces peptídicos.
La reacción debe su nombre al Biuret, una molécula formada a partir de dos de urea (H2N-CO-NH-CO-NH2), que es la más sencilla que dapositiva esta reacción, común a todos los compuestos que tengan dos o más enlaces peptídicos consecutivos en sus moléculas.
Método Bradford.
Se basa en la unión de un colorante, Comassie Blue...
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