Cultivos In Vitro

El primer antecedente sobre cultivos in vitro fue el realizado por Philip White en 1934, quien logro cultivar ápices de raíces de tomate en medio enriquecidos con sales, azúcar y levaduras (Pacheco, et al, 1987). No obstante, Philip White, Roger Gautheret y Pierre Nobecourt en 1939 publicaron los resultados de sus trabajos. Los trabajos se enfocaron a la estandarización de técnicas deaislamiento de tejidos, al estudio de sus procesos fisiológicos y bioquímicos y a la determinación de medios de cultivo artificiales para mantener la viabilidad celular (Pacheco, et al, 1987). Este hecho demostrativo constituye en sí el despegue de las técnicas de cultivo in vitro.
Igualmente, el método para la producción in vitro de plantas de Anthurium andreanum Lind., fue desarrollado por primeravez por Pierik, en 1974 sobre un medio nutritivo en condiciones estériles que permitirá la reproducción de las mismas.
2.2.- Antecedentes de la investigación.
Dentro de las investigaciones relacionadas con el cultivo in vitro del Anthurium andreanum Lind se puede señalar la realizada Liendo y Mogollón (2008), quienes se plantearon como objetivo estudiar a partir de brotes iniciados invitro la multiplicación clonal de esta especie. La misma fue desarrollada en tres fases. La fase A consistió en la multiplicación de brotes, la cual se logró con éxito al cultivar los brotes en un medio de Murashige y Skoog (MS) suplementado con 1 mg.L -1 Benciladenina (BA). La fase B, que correspondió al enraizamiento de los brotes, se obtuvo el mejor resultado al cultivar estos en un medioMS con 0,1 mg. L-1 de ácido naftalenacético (ANA). La aclimatización de las plantas se estableció gracias a las condiciones ambientales de nebulización y cámara húmeda. Esta investigación permitió establecer los protocolos para la obtención de vitroplantas de la especie.
Así mismo, Trujillo y col., (2000), propagaron in vitro plantas de Anthurium andreanum Lind. Variedad ‘Sonate’ en el Centrode Bioplantas de la Universidad de Ciego de Ávila en Cuba. El propósito de esta investigación era lograr la regeneración de plantas a partir de callos formados en hojas jóvenes, así como el enraizamiento de brotes, con vistas a desarrollar una tecnología de propagación in vitro de esta variedad.
En esta investigación se tomaron plantas jóvenes de 1 año que crecían en condiciones controladas.Utilizando como medio basal en todos los experimentos, el compuesto por las sales inorgánicas MS modificada con 0.950 g.L-1 de KNO3 (Nitrato de potasio) y 0.825 g.L-1 de NH4NO3 (Nitrato de Amonio).
Durante la investigación se establecieron cuatro (4) ensayos que se correspondía a cada una de las etapas para la propagación in vitro de las plántulas; el primer ensayo consistía en la formación decallos con diferentes medios de cultivo, el segundo ensayo en la formación de callos a partir de hojas con diferentes estado fisiológicos; el tercer ensayo consistía la regeneración de brotes y por último ensayo el enraizamiento.
En cada ensayo realizaron diferentes procesos, En el ensayo 1, para la formación de callos se utilizaron hojas jóvenes que se sometieron a un proceso de lavado condetergente comercial y agua corriente. La desinfección se realizó con hipoclorito de calcio al 2.0 % durante 20 minutos dentro de la cámara de flujo laminar, luego se enjuagaron tres veces con agua destilada estéril para eliminar todo resto del agente desinfectante. Una vez desinfectadas las hojas, se cortaron en segmentos de aproximadamente 1 cm2 y se colocaron en diferentes medios de cultivo deacuerdo al experimento en cuestión. En todos los experimentos se emplearon cinco réplicas por tratamiento.
En el ensayo 2, a utilizaron tres tipos de hojas que por su edad y características externas evidenciaron tener diferentes grados de madurez. Se clasificaron en: Jóvenes, maduras y viejas. Luego de aproximadamente 12 semanas de iniciado el cultivo se evaluó la formación de callos para cada...