Curva de calibración/espectofotometría
Páginas: 2 (443 palabras)
Publicado: 17 de septiembre de 2012
ANEXO 1: CURVA DE CALIBRACIÓN EN ESPECTROFOTOMETRÍA
La técnica para cuantificar la concentración real de muestras experimentales por
espectrofotometría, se lleva a cabo preparando una solución deuna sustancia
patrón cuya concentración de interés sea conocida. Por ejemplo, para conocer la
concentración de iones fosfato en muestras experimentales, se prepara una
solución diluida de unasustancia o reactivo lo más puro posible que contenga
iones fosfato (PO4-), denominada la “solución patrón”, para lo cual se pueden
utilizar reactivos como KH2PO4, K2HPO4, entre otras.
Estás técnicasse encuentran en la literatura y artículos de investigación, donde se
puede encontrar con qué sustancia cromófora, se puede reaccionar la solución
patrón y las muestras experimentales, de tal formaque la reacción entre ellas
dependa de la concentración de interés, en este caso los iones fosfato. La
solución coloreada, formada entre la sustancia cromófora y la solución patrón, se
diluyesucesivamente, de mayor a menor concentración; de cada dilución, se mide
el valor de la absorbancia a una longitud de onda óptima, la cual se consulta en
las técnicas reportadas en la literatura o sepuede utilizar la técnica de barrido por
espectrofotometría, para encontrar la longitud de onda experimental, a la cual la
solución coloreada absorbe mayor cantidad de luz.
Al representar gráficamentelos valores de absorbancia (ABS) vs. la concentración
de las diluciones de la sustancia coloreada, procedimiento con el cual se obtiene
una curva de calibración de la sustancia patrón. En lasiguiente figura se
representa una curva de calibración de una solución de KH2PO4.
Figura 1. Curva de calibración de la concentración de una solución de KH2PO4.
Curva
En la figura anterior, sepueden ver los puntos experimentales, a los cuales se les
puede
encuentra
encuentra la línea de tendencia y su correspondiente ecuación; la ecuación que
representa la línea de tendencia de los puntos...
La técnica para cuantificar la concentración real de muestras experimentales por
espectrofotometría, se lleva a cabo preparando una solución deuna sustancia
patrón cuya concentración de interés sea conocida. Por ejemplo, para conocer la
concentración de iones fosfato en muestras experimentales, se prepara una
solución diluida de unasustancia o reactivo lo más puro posible que contenga
iones fosfato (PO4-), denominada la “solución patrón”, para lo cual se pueden
utilizar reactivos como KH2PO4, K2HPO4, entre otras.
Estás técnicasse encuentran en la literatura y artículos de investigación, donde se
puede encontrar con qué sustancia cromófora, se puede reaccionar la solución
patrón y las muestras experimentales, de tal formaque la reacción entre ellas
dependa de la concentración de interés, en este caso los iones fosfato. La
solución coloreada, formada entre la sustancia cromófora y la solución patrón, se
diluyesucesivamente, de mayor a menor concentración; de cada dilución, se mide
el valor de la absorbancia a una longitud de onda óptima, la cual se consulta en
las técnicas reportadas en la literatura o sepuede utilizar la técnica de barrido por
espectrofotometría, para encontrar la longitud de onda experimental, a la cual la
solución coloreada absorbe mayor cantidad de luz.
Al representar gráficamentelos valores de absorbancia (ABS) vs. la concentración
de las diluciones de la sustancia coloreada, procedimiento con el cual se obtiene
una curva de calibración de la sustancia patrón. En lasiguiente figura se
representa una curva de calibración de una solución de KH2PO4.
Figura 1. Curva de calibración de la concentración de una solución de KH2PO4.
Curva
En la figura anterior, sepueden ver los puntos experimentales, a los cuales se les
puede
encuentra
encuentra la línea de tendencia y su correspondiente ecuación; la ecuación que
representa la línea de tendencia de los puntos...
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