curva de calibracion

Qué se entiende por curva de calibración?

Se trata de una curva de referencia construida con cantidades conocidas de una sustancia (por ejemplo la albúmina sérica bovina que vimos antes) que seutiliza para determinar la cantidad de esta sustancia (proteínas) presente en una muestra incógnita.
En muchas determinaciones se cumple una relación proporcional entre la magnitud o intensidad decolor que da una reacción y la cantidad del reactivo que la provoca. Por ejemplo: si la presencia de 10 ug de proteínas en una solución genera la aparición de un color azul pálido cuando es agregada a unamezcla reactiva, la presencia de 20 ug de proteína dará lugar a que la solución se torne azul más oscuro y así sucesivamente.Para realizar la experiencia debemos preparar unas diluciones seriadas de albúmina séricabovina como las que hicimos antes (será nuestro estándar o patrón) y dispondremos así de por lo menos 5 concentraciones, luego realizaremos la reacción química correspondiente para desarrollar color ymediremos la intensidad de color de cada solución. Por ej., partiendo de una solución madre de 1mg/ml, tendremos 6 tubos así:









La relaciónentre intensidad de color y concentración de la sustancia (una medida de la cantidad de esa sustancia) es proporcional y así, si se grafica el valor de intensidad de color medido con un aparatoadecuado (espectrofotómetro o colorímetro) en función de las concentraciones crecientes de la sustancia se obtiene una recta. Es decir, a mayor cantidad de proteína, mayor cantidad de producto de reaccióny por lo tanto, mayor intensidad de color.



Curva de Calibración

Dado que se ha trabajado con datos reales, los gráficos que se obtienen no son tan ideales, pero esta situación no es un...